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种植体表面纳米改性对成骨细胞活性及骨整合的影响 现在，种植牙齿是一种传统的治疗方法，由于其明显的临床优势，已成为牙科修复的首选。种植体的表面改性对种植体的生物学活性和临床疗效有着重要的影响。由于细胞在机体内所接触的界面均为纳米级结构, 如各种组织的基膜由50～200 nm大小的凸/凹表面构成, 学者们开始尝试在生物材料表面构建纳米尺度的仿生表面, 以提高其生物学活性。构建纳米微形貌和制备纳米相结构是种植体表面纳米改性的两大研究方向。表面纳米微形貌主要通过采用光刻、表面机械研磨、气动喷丸等处理方法获得, 如纳米点隙、纳米沟槽、纳米凸起、纳米纹理等。目前种植体材料表面改性多采用涂层或沉积的方法制备纳米相结构, 因为直接制备三维尺寸的纳米晶材料的技术具有一定的局限性, 只能制备出尺寸小、形状简单的纳米晶样品, 很难满足工程材料的实际要求。本文从体外、体内两种角度, 就种植体表面纳米改性对成骨细胞活性及骨整合的影响作一综述。 1 纳米结构材料的作用机理 当种植体植入骨组织, 一些组织蛋白如纤粘连蛋白等会首先黏附在其表面形成蛋白层。通过蛋白层的介导, 组织细胞开始在种植体表面聚集、黏附。细胞与基质表面黏附处称为粘着斑 (focal adhesion) 。粘着斑外表面为特异性蛋白受体--整合素 (integrin) , 它是介导细胞与细胞外基质黏附的主要成分。整合素分子能特异性地识别精氨酸-甘氨酸-门冬氨酸序列 (Arg-Gly-Asp) , 即RGD序列。许多胞外基质黏附蛋白中含有该序列, 包括纤粘连蛋白 (fibronectin) 、玻连蛋白 (vitronectin) 、层粘连蛋白 (laminin) 等, 该序列对于介导成骨细胞在材料表面的黏附具有重要意义。纳米结构可以改变这些包含RGD序列的蛋白的构象, 从而影响细胞的黏附行为。Webster等研究发现, 吸附在纳米相陶瓷表面的玻连蛋白相对于传统陶瓷表面具有伸展更好的蛋白构象, 呈现出更多可供成骨细胞黏附的位点。除了玻连蛋白, 纤粘连蛋白在纳米相陶瓷表面也表现出相似的黏附特性。 种植体材料表面的润湿性, 也是影响胞外基质蛋白在材料表面黏附的一个重要因素。研究证明, 亲水性表面有利于蛋白的黏附以及后续的细胞黏附过程。纳米材料的应用, 可提高种植体表面的润湿性。Webster等研究发现, 将氧化铝陶瓷颗粒尺寸从167 nm降低到24 nm, 材料的接触角减小为原来的1/3, 即亲水性能提高。并发现, 玻连蛋白在亲水性强的纳米相陶瓷表面具有更好的黏附特性。 2 植物表面的纳米改性对成骨细胞活性的影响 2.1 减少成骨细胞黏附 具有纳米表面形貌的种植体材料对细胞黏附具有选择性。纳米表面可以选择性增强成骨细胞的黏附, 同时可减少成纤维细胞的黏附。有研究发现, 成骨细胞和成纤维细胞在纳米相陶瓷材料表面的黏附指数为3∶1, 而在传统陶瓷材料表面则为1∶1。 2.2 纳米金属复合材料 成骨细胞在材料表面黏附、铺展、增殖、分化过程中, 细胞的黏附和铺展对增殖和分化起着介导和调节作用, 使它成为评价材料表面性能的重要指标之一。纳米相植入材料的表面粗糙程度呈几何级数增长, 大大增加了材料与周围组织接触的表面积, 有利于成骨细胞黏附。Webster等观察了成骨细胞分别在纳米相和微米相的钛 (Ti) 、钛铝钒合金 (Ti6Al4V) 、钴铬钼合金上的黏附生长情况, 发现与微米相的合金相比, 无论哪一种合金的纳米相均更有利于成骨细胞的黏附生长。虽然纳米相和微米相金属颗粒所含的原子相同, 但纳米相颗粒的原子数目少且直径更小, 从而更多的集中在空位、边界、台阶等表面缺陷部位, 而这些区域正是蛋白吸附的活性区域, 从而促进了细胞的黏附。纳米表面微形貌可以控制细胞的黏附和铺展。Dalby等研究人骨髓基质细胞在具有纳米点隙的材料表面的生物学行为时发现, 高密度的纳米点隙减少了细胞的分布, 而点隙的随机排列则有利于细胞的铺展。而且, 尺寸不同的纳米微形貌特征也会对细胞生长起到不同程度的促进作用。 2.3 纳米表面的活性成分 纳米表面可以促进黏附的成骨细胞的增殖。Webster等将纳米相陶瓷材料 (氧化铝、氧化钛、羟基磷灰石) 对成骨细胞功能的影响与传统的微米相陶瓷材料进行比较, 发现三种纳米材料表面的细胞增殖率均有显著的提高。关于纳米结构表面对于成骨细胞的增殖调节机制尚不十分明确, 一般认为细胞黏附过程相关的众多生物学事件影响着信号通路的传导, 该信号传导通路加速了细胞的增殖过程。除了种植体表面的细胞黏附及增殖, 骨髓间充质细胞向成骨细胞的分化以及成骨细胞分泌钙基质的矿化成骨过程对于形成骨整合至关重要。在Webster等的实验中, 氧化铝、氧化钛、羟基磷灰石3种纳米材料表面成骨细胞的碱性磷酸酶 (ALP) 活性以及细