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椎间盘退变动物模型研究进展 椎间盘退行性疾病（ihd）是骨科的常见临床疾病和常见病，但目前关于性别和病理生理的规定尚不清楚。建立一种可靠的椎间盘退变动物模型能够为研究椎间盘退变发病机制提供有利条件,同时为修复治疗退变椎间盘的各种研究提供良好的实验载体。我们就近年来建立椎间盘退变动物模型的研究进展作一综述。 1 腰椎退变的确定 从Lob等(1933)通过损伤兔椎间盘纤维环观察到退变现象至今,制作椎间盘退变动物模型已有70余年历史。许多学者选择不同的动物,通过不同的方法成功地建立了椎间盘退变动物模型。按退变发生的原因不同可将模型分为两大类,即诱发性和自发性椎间盘退变模型。前者是通过实验方法诱发椎间盘退变,进一步分为3种:①改变椎间盘生物力学环境诱发退变;②损伤椎间盘自身结构诱发退变;③通过基因敲除技术制作退变模型。自发性模型是一些特殊的可自发出现椎间盘退变的动物种系,其中包括通过特殊方法饲养或改变遗传性状而出现椎间盘退变的动物。到目前为止,已用于建立椎间盘退变模型的动物包括鼠、兔、犬、羊、猪、猴以及狒狒等十余种。 在建立动物模型的方法选择上,自发性退变动物模型由于动物少、退变机制不清且实验周期长等限制,应用较少。在动物模型的物种选择上,虽然灵长类与人类在解剖生理上最为接近,但由于动物实验伦理和经济因素的限制,也难以广泛应用。因此目前研究中,以鼠或兔制作的诱发性椎间盘退变模型应用最为广泛。无论采用哪种方法或物种,理想的椎间盘退变动物模型应满足以下条件:①与人椎间盘退变过程具有相似性和可比性;②具有良好的可重复性;③具有易操作性和经济性。 2 诱导性胎盘退化模型 2.1 改变椎间盘生物力学环境，鼓励退化模型 2.1.1 腰椎退变与正常模式分析 流行病学资料证实脊柱受力和椎间盘退变两者间存在联系,一些动物模型中可以观察到在外力经常作用的部位容易产生椎间盘退变。在早期的研究中,如Lindblom等(1952)利用弯曲鼠尾部的方法建立椎间盘退变模型,通过将鼠尾部弯成U形,每日保持12 h,持续观察2周~14个月后发现,在鼠尾部凹侧可见纤维环肿胀,结缔组织破坏,细胞数减少,出现明显退变征象。他认为退变的程度取决于弯曲时间长短,椎间盘退变的实质是一种应力性萎缩。另一些早期的研究则是通过截除新生大鼠前肢,使其在饲养过程中改变姿态,依靠双后肢直立行走,使腰椎间盘负重增加从而产生退变。 近年来,许多学者开始采用动力轴向加压的方法,研究不同强度、频率和持续时间的轴向载荷对动物椎间盘退变的影响,并对其生化指标、基因表达改变以及退变机制进行深入研究。 Maclean等研究表明,压力可以导致应力在椎间盘重新分配,继而引发局部生物学反应。当椎间盘被施加压力的时候,首先髓核压力提高,纤维环张力增加,当外力持续存在并超过椎间盘的膨胀压,髓核容积随之减少,其后压力被重新分布到内层纤维环。他们的研究结果还表明,纤维环细胞和髓核细胞对压力强度、频率和持续时间的反应有明显差异。最近,Oliphant等通过直接向椎间盘内注入不同压强的高压气体,进一步探讨了椎间盘内压力变化造成的影响。 2.1.2 应力型动物模型与腰椎不稳退变模型 此类动物模型是通过手术破坏关节面或棘突等支撑组织,反复刺激脊柱肌肉或进行脊柱相邻节段融合等方法间接地使脊柱过度运动而实现。在对颈椎的研究中表明,通过过量及反复运动会触发椎间盘一系列改变,包括纤维环内外层分离、纤维环破裂、细胞形态改变,甚至凋亡以及骨赘形成。在最近的研究中,Wang等通过切断大鼠颈部肌肉和颈椎棘上、棘间韧带,造成颈部动、静力失衡,诱发椎间盘退变,电镜下观察到超微结构典型的退变表现。与应力型动物模型不同的是,髓核改变在早期不明显。 总之,以上两类模型均是通过改变椎间盘生物力学环境来加速椎间盘退变。应力型模型促使椎间盘从内到外发生退变,而脊柱不稳所致退变模型通过外力作用刺激椎体边缘重塑,并由外向内加速椎间盘退变。无论哪种方法,在刺激因素长期存在的前提下,最终椎间盘改变是一致的。 2.2 病变胎盘结构的损伤引起了退变模型 2.2.1 细胞退变和终板损伤与髓核血清学的关系 通过外科手术的方法损伤纤维环或终板引发椎间盘退变是广泛应用的一种建模方法。早期研究,如Osti(1990)将2岁的Merino羊,通过手术造成纤维环前份边缘性损伤而建立椎间盘退变模型,术后观察椎间盘变化。切开纤维环仅在外1/3层见肉芽组织形成,术后180 d内几乎均继发出现内层纤维环断裂及向切开部位突出的髓核样物质。相关研究也表明椎间盘在创伤后短期内出现蛋白多糖和水分严重丢失,并在最初2周内,部分得以恢复。然而,随着纤维环细胞转变为软骨细胞及胶原产物的增加,仍会出现蛋白多糖和水分丢失,最终演变为髓核纤维化。Fazzalari等在羊外周纤维环损伤的研究中发现,这种损伤最终将