异烟肼的光度分析研究.docVIP

【标题】异烟肼的光度分析研究 【作者】张 娅 妮 【关键词】异烟肼，茜素，分光光度法 【指导老师】江 虹 【专业】化学 【正文】1.??引言异烟肼，其化学名为4-吡啶甲酰肼。它可以抑制结核菌菌壁分枝菌酸成份的合成，从而使结核杆菌丧失多种能力（耐酸染色，增殖力，疏水性）而死亡，异烟肼还能与结核菌菌体辅酶结合，起到干扰脱氧核糖核酸和核糖核酸合成的作用，从而达到了杀灭结核菌的目的。而且对代谢活力强的结核菌作用更强。病人在服用异烟肼以后，在胃肠道内迅速被吸收进入血内，通过血液循环广泛分布于全身各组织体液中，在胸水、腹水、胆汁、脑脊液中都可以达到一定的浓度，起抑制细菌的作用。异烟肼还可以渗入结核病的干酪病灶中，所以，异烟肼不失为一种很好的抗痨药物。异烟肼的口服安全性很高，副作用很少，由于副作用致病人无法承受而必须停药的病人是极少数的，因此异烟肼在临床上应用非常广泛，故对其含量进行分析检测研究具有极大的意义。异烟肼常用的测定方法有高效液相色谱法[1~2]、流动注射化学发光法[3~5]、紫外分光光度法[6~7],此外,还有电催化还原化学发光法[8]、近红外光谱法[9]等。本研究利用易于普及的紫外-可见分光光度计，采用茜素可见分光光度法测定异烟肼的含量。研究中发现在pH=4.8-6.0的条件下，异烟肼与茜素（ALZ）反应生成红色络合物，最大吸收波长位于542nm，异烟肼在一定浓度范围内遵从朗伯-比尔定律，由此建立了测定异烟肼的光度分析法，并探讨了适宜的反应条件和主要分析化学性质。该法用于市售药物中异烟肼含量的测定，结果满意。2.?实验部分2.1 ?仪器和试剂???? U-3010型紫外-可见分光光度计（（天美公司，香港）；T6新世纪型紫外-可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；Seven Easy实验室pH计（梅特勒—托利多仪器（上海）有限公司）；电子天平EL104（梅特勒—托利多仪器（上海）有限公司）。异烟肼标准溶液：储备液浓度1.0×10-3mol/l，操作液1.0×10-4mol/l。茜素的乙醇溶液1.0×10-3mol/l。HAc-NaAc缓冲溶液：0.2 mol/L NaAc溶液与0.2 mol/LHAc溶液按一定比例混合，用Seveneasy型实验室酸度计检测配成一系列不同pH值的缓冲溶液。表面活性剂：溴化四乙基钠（TBAB）0.5g/L；溴化十六烷基吡啶（CPB）0.5g/L；溴化十四烷基吡啶（TPB）0.5g/L；十二烷基磺酸钠（SDBS）10g/L；十二烷基苯磺酸钠 8g/L；溴化四乙基铵(TEAB)1.5g/L；乳化剂（OP）1%；SLS 0.5g/L；溴化十六烷基三甲基钠(TMAB) 0.5g/L。异烟肼为生化试剂，其余试剂均为分析纯。实验用水为超纯水。2.2?实验方法????于10mL比色管中，准确加入一定量的1.0×10-4mol/l异烟肼标准溶液，再依次准确加入1.0mL1.0×10-3mol/L?茜素溶液和1.0mL pH=5.46的HAc-NaAc缓冲溶液，用乙醇稀释至刻度，摇匀，以试剂空白为参比，在最大吸收波长处以1cm液池测其吸光度。3.?结果与讨论3.1?吸收光谱按实验方法配制溶液后，于U-3010型紫外-可见分光光度计上扫描吸收光谱（图1、图2）。图1表明，异烟肼在可见光区几乎无吸收（曲线1），茜素（ALZ）在可见光区产生强烈吸收，最大吸收波长为512nm（曲线2），当在异烟肼溶液中加入茜素溶液时（pH=5.46）发生显色反应生成红色物质，最大吸收波长为542nm，红移30nm。异烟肼在一定浓度呈良好的线性关系（图2）。可见，显色法可用于异烟肼含量的测定。?????????????????????????????????3.2 ??反应条件的选择3.2.1??稀释剂的影响在10mL的比色管中加入1.0mL的异烟肼标准溶液，再加入1.0mL pH=5.46的HAc-NaAc和1.0mL的茜素溶液，分别用水、甲醇、乙醇作溶剂，以试剂空白作参比测定体系的吸光度。结果表明，用乙醇作稀释剂时，体系具有较高的灵敏度。故本实验选用乙醇作稀释剂。3.2.2??显色剂用量的选择在10mL的比色管中加入1.0mL的异烟肼标准溶液和1.0mLpH=5.46的HAc-NaAc，再分别加入V=0.5mL，1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL、3.5mL浓度为1.0×10-3mol/l茜素溶液。以试剂空白作参比测定不同用量的茜素溶液对体系灵敏度的影响。结果表明，浓度为1.0×10-3mol/L茜素溶液用量为1.0mL时比较适宜，实验选用1.0mL。3.2.3??缓冲溶液用量及pH值的选择?在9支10mL的比