肝片形吸虫制片标本的制作技术.pdfVIP

2009年第3期 (总第 146期) 试验研究 肝片形吸虫制片标本的制作技术 唐爱芬 (山东省淄博市博山区畜牧兽医局 255200) 摘要 为了制作效果 良好的肝片形吸虫制片标本，以便于更好的为教学和科研服务，对福尔马林固 定、苏木精染色、二甲苯透明及中性树胶封固等处理方法的用量和处理时间进行摸索，寻找最佳条件， 提高肝片形吸虫制片标本的效果。结果表明对标本进行酒精梯度脱水处理并延长二甲苯的透明时间，制 片标本的观察效果明显提高，经处理后的虫体染色效果良好，吸盘、消化道、生殖系统等特征结构清晰 可见 。 关键词 肝片形吸虫 染色 标本 中图分类号：$852．735 文献标识码：A 文章编号：1007．1733(2009)03．0009．03 寄生虫标本在寄生虫学的教学科研、寄生虫病 液中可 以更好的舒展形态。 的诊断和防治工作中发挥着十分重要的作用I6】，因 (4)将虫体以福尔马林固定液固定24h后，保 此，研究标本的制作方法也就成为寄生虫学的一项 存于 3~／o,-~5％的福尔马林溶液中。 重要。本次研究是将寄生虫处理、染色制成制片标 (5)将较大较厚的虫体标本压入两载玻片中， 本，来延长标本的保存时间。而且可显示原始状态 然后以橡皮筋扎紧玻片两端 (为了不使虫体压得过 下难以观察的结构，是鉴别寄生虫虫种的重要手段 薄可在玻片两端垫 以适当厚度的纸片)。 【7】 。 根据寄生虫标本 自身特性，一个永久性标木的 (6)将保存于福尔马林溶液中的虫体取出以流 制作过程包括固定、染色、脱水、透明和封片等5 水冲洗 1h，然后用蒸馏水浸泡 5h，其中前2h每 个步骤。但具体到不同虫种，其实际操作步骤亦有 0．5h换 1次水 。 所不同8【】。绝大多数染色方法都较为烦琐，染色质 (7)将虫体放入苏木素染液中染色，将染色的 量的好坏与工作经验有着很大的关系。本文介绍了 虫体分为淡红色、红色、葡萄酒色、深葡萄酒色等 肝片形吸虫玻片染色标本的制作技术。 4组染色效果作对比试验。 1材料与方法 (8)依次通过 30％、50％、70％的酒精溶液脱 1．1标本来源 水处理时，先后分成若干个小组作试验 ，脱水时间 本次试验 的肝片形吸虫 l扫青岛农业大学寄牛 分别为 30min、35min、40min、45min。 虫实验室提供，以弯头解剖针挑出后，放入 1％的 (9)将脱水后的虫体用酸酒精做脱色处理时， 盐水中浸泡，充分振荡去除污物。 对染色处理后的虫体做 1min、3min、5min、7min、 1．2 染料和试剂 9min的分组试验，观察虫体的脱色效果。 无水 乙醇、二 甲苯、盐酸、氯化钠、甲醛、甘 (10)将脱色完的虫体再依次通过 80％，90％~D 油、甲醇、铵明矾、苏木素、加拿大树胶、碘、薄 100％的酒精脱水处理，在脱水时也将时间分为几 荷脑。 个组别 ：30min、40min、50min、60min。 1_3 仪器和器材 (11)将脱水后的虫体放置二甲苯中透明，对透 显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、试管、广 明的虫体随时取出观察以确认虫体透 明的程度刚 口瓶 。 好达到标准，而不使其出现透 明过渡的现象。 1．4 溶液 (12)在盖玻片上滴加一滴中性树胶 ，封固标本 。 薄荷脑溶液、福尔马林固定液、苏木素染液、 (13)标本观察。 酸酒精溶液、碘酒精溶液、酒精溶液。