氯化钆诱导大鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡的研究.pdfVIP

中国宴用医药 2010年6月第5卷第 16期 ChinaPracMed，Jun2010，Vo1．5，No．16 · 论 著 · 氯化钆诱导大 鼠腹腔 巨噬细胞 内质 网应激 和凋亡的研究 黄学桂 赵隽 I摘要】 目的 探讨氯化钆对大鼠腹腔巨噬细胞 内质网应激和凋亡的作用。方法 分离和培养 大鼠腹腔巨噬细胞 (PM中)，分别经氯化钆 (Gd)和衣霉素 (Tunicamycin)处理后，采用细胞免疫组化S—P 法检测ARMET的表达 ，免疫荧光双标染色检测ARMET和 CHOP的表达 ，PI染色观察对细胞凋亡的影 响。结果 氯化钆处理组细胞数 目减少，胞体变小变圆；ARMET在氯化钆组 (5×10 moL／L)的阳性细胞 百分数为(42．1±6．6)％，在正常对照组的阳性率为(6．1±1．6)％，差异有统计学意义 (P0．05)；而其 在阳性对照Tunicamyein组的阳性率为(43．4±5．9)％，两者差异无统计学意义 (P0．05)；免疫荧光双 标染色提示氯化钆组ARMET和CHOP均高表达；PI染色可见氯化钆组细胞被深染、胞核断裂等凋亡特 征。结论 氯化钆可诱导大鼠腹腔巨噬细胞内质网应激和凋亡，其作用机制可能与胞内钙超载引起的 非折叠蛋白反应有关。 【关键词】 氯化钆；巨噬细胞 ；内质网应激；凋亡 Studyofendoplasmicreticulum stressandapoptosisofperitonealmacrophageinratinducedbyGadolin— iumchloride HUANGXue—gui，ZHAOJun．HefeiWomenandChildrenHealthCenter，Hefei230000，China 【Abstract】 0bjective Toinvestigatetheeffectofendoplasmicreticulumstressandapoptosisofperito- healmacrophageinratinducedbyGadoliniumchloride．Methods Ratperitonealmacrophage(PM )werei— solatedandcultured．AfterPM中 treatedwithGadolinium chlorideandTunieamyein．theexpressionofARMET wasdeterminedbyimmunohistochemicalmethod，immunoflurorescentdoublestainingwereemployedtodetect theexpressionofCHOPandARMET．PIstainwasusedtoobservePM中sapoptosis．Results Theamountof ceHsweregreatlyreducedandhtecellbodywereshrinkedtoroundinGdC13rgoup．ThepercentageofcellAR— METpositive—expressedwere(42．14-6．6)％ inGdCI3group(5×10-6moVL)，whilethevalueofcontrol groupwere(6．1±1．6)％，htedifferencebetweenhtetwogroupswassignificant(P0．01)．Butcompared withhtevalueofGdC13rgoupwere(43．4±5．9)％ ，thereWasnosignificantstatisticaldifferenceinARMETex— pression．TheexpressionofARMET andCHOPweremarkedlyhigh in GdC13rgoup byimmunofluoreseenee doublelabeledstain．PIstainrevealedtheapoptosisfeaturethatcellsweredeeplyred-stainedandnuclearfrag- ment．Conclusion GdC13caninduceendoplasmicretieulum stressandapoptosisofperitonealmacrophagein rat，thepotentialmeachnism isrelatedtoendo