玻璃%2fPDMS复合微流控芯片用于单胺类神经递质的快速分析.pdfVIP

全国生物医药色谱学术交流会(2008)论文集 B36玻璃／PDMS复合微流控芯片用于单胺类 神经递质的快速分析 黄勇李向堂石明赵书林术 广西师范大学化学化工学院桂林541004 管系统、神经系统、内分泌腺、肾脏、平滑肌等组织系统的生理活动、学习记忆、心血管活 动和脑循环中起着广泛的调节作用。研究人体液中多巴胺和肾上腺素及其测定方法，对于临 床医学和生理学研究有着重要的实际意义。 芯片毛细管电泳作为一种新的微分析技术，自20世纪90年代初提出以来，以其高速、高效、 样品耗母少，自动化和集成化等特点，广泛应用于于化学、生物学、医学等领域分析中。在芯片 毛细管电泳中，单胺类神经递质的分离和测定，主要采用玻璃芯片、PDMS／PDMS芯片，检测 方法有电化学检测…，及发光二极管激光诱导荧光检测[2】。 nm 本文采用自制的玻璃／PDMS复合芯片，以异硫氰酸酯荧光素(FrrC)衍生单胺，用473 的半导体激光器为激发光源，在微流控芯片共聚焦激光诱导荧光检测系统上，对DA和E进 cm的芯片上，120 行了分离检测。在优化的实验条件和有效分离长度为5．5 S内实现了DA和 E的快速分离。应用于人尿液中DA和E的同时测定，结果满意。 1．仪器与试剂 QI广-2000型微流控芯片／激光诱导荧光检测仪(山东师范大学产品)，配473nm半导体激 光器。光路为共聚焦型设计，荧光信号经过滤光片后由PMT收集转变为电信号，由HW．2000色 谱工作站记录． 184型PDMS预聚体及固化齐IJ(Dow SG4009匀胶铬板(长沙韶光微电子总公司)；Sylgard ComingCorp．，USA)；异硫氰酸酯荧光素(FITC)，多巴胺盐酸盐，肾上腺素，胍基丁胺，氨基酸购贿 于Sigma公司，十二烷基硫酸纳(SDS)为上海化学试剂厂进口分装，其余试剂为国产分析纯。 mol／LHF+1mol／L 铬刻蚀液(硝酸铈铵+高氯酸)；玻璃刻蚀液(1 NH4F)；实验用水为Milli．Q的 去离子水。 2．玻璃／PDMS复合芯片的制作 玻璃基片参考文献【3l的制作方法。将SG4009匀胶铬板在强紫外光源下曝光，然后进行显 影、刻蚀、除膜，得到带有通道的玻璃基片。PDMS盖片的制作：将PDMS预聚物及固化剂以质 h， 量比为10：1的比例混合均匀，脱气后’，j、心把混合物浇注于玻璃模具中，在80。C烘箱中聚合2 mnl孔作为贮液池，即可得到 脱模后。裁成与基片大小一致的PDMS片，并在相应位置打3．5 h后，1 PDMS盖片。PDMS盖片放在254nm紫外灯下照射2min内与基片贴合并放置24h，即 得到玻璃／PDMS复合芯片。 3．样品衍生． 9．2的20 mmol／L的DA和 取适量的DA和E标准品溶解于pH nunol／L硼砂缓冲溶液中配成1．7 mol／L p uL2．0×10‘j 1．3mmol／L的E储备液。各取2L标准溶液于0．5InL的离心管中，加入60 p