骨髓间充质干细胞缺血培养上清细胞因子分析.pdfVIP

· 380 · 浙江临床医学2015年3月第17卷第3期 · 实 验 研 究 · 骨髓问充质干细胞缺血培养上清细胞因子分析 滕 小梅 MdAbdurRobRayhan 刘廷兴 沈振亚★ 【摘要 】 目的 研究骨髓间充质干细胞在缺血条件下分泌的细胞因子浓度变化。方法 用全骨髓差异贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞 (BMSCs)，取第3代细胞进行实验。实验分两组：A组提取正常培养细胞的上清液；B组将细胞置于无血清的培养基中24h后 ，提取上清液。 采用蛋白分析技术检测细胞培养上清液q27种细胞因子变化情况。结果 无血清细胞培养组中IcAM．1、IFN．．y和IL一10的浓度与有血清的细 胞培养组比较差异有统计学意义 (P0．05)。结论 骨髓间充质干细胞在缺血条件下分泌的炎症相关细胞因子发生变化。 【关键词】 骨髓间充质干细胞 缺血培养 细胞因子 【Abstract】 0bjective Tostudythesecretedcytokineconcentrationchangesofbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)inischemic conditions．Methods Boneinarrow mesenchymalstem cellswereculturedbyadherentcultureofwholebonemarrow．Thethirdgenerationofcellswereused inhtisstudy．Theexperimentsweredividedintotwogroups：A．Th esupematantwwascollectedfrom normalcellculture．B．Th esupematantwasfrom cellsin serum—freemedium 24h．27kindsofcytokinesnihtesupematantwereanalyzedthroughhteproteinassay．Results Compraedwihthtenormalculturecondition group，hteconcentrationofICAM一1，IFN一^vnadIL一10nihteserum-freeculturegroupweresignificantdecreased．(V0．05)．Conclusion Therewere changesinhteinflammationrelatedcytokinessecretedbybonemarrow mesenchymalstem cellsinhteischemiccondition． 【keyword】 Bonemarrowmesenchymalstemcells Ischemicconditionscytokines 骨髓问充质干细胞 (Bonemarrow—derivedmesene— 7月分别应用有血清和无血清培养基培养 MSC，研究 hymalstemcells，BMSCs)改善心功能的研究已成为国 其分泌的细胞因子差异，探讨骨髓间充质干细胞在急 际研究热点，但细胞移植改善心脏功能的机制仍存在 性缺血环境下的旁分泌作用。 许多争议，目前主要认为干细胞的旁分泌机制发挥主 1 材料和方法 要作用，即骨髓间充质干细胞分泌大量细胞因子抑制 细胞凋亡，促使心脏毛细血管生长，改善衰竭心肌血供， 1．1 材料 健康 8周龄清洁级 sD大鼠10只，均从中 抑制炎症反应，减轻心肌损伤。作者 自2014年 1月至 国科学院实验动物中心购买，之后均按照 GLP于苏州 大学心血管病研究所实验室动物房进行喂养和观察。 低糖 DMEM培养基 (Hyclone)、胎牛血清 (Gibco)、 基金项 目：苏州市科技计划项 目资助 (SYS201327) QAR—CYT一3芯片 (Raybiotecho 作者单位：215006苏州大学