维肝降酶复方与辨证代表方对模拟临床病证相合肝损伤动物模型疗效的对比与研究.pdfVIP

中华巾医药学会第十五届内科肿胴病学．术会议甓圜家中医药管理局专科专病协作组(肝病组、传染病组)会议 维肝降酶复方与辨证代表方对模拟临床病证相合肝损伤动物 模型疗效的对比研究 殷晓轩1孙世萍1陈惠惠2刘慕冰2孙闵3 l摘要l目的：通过维肝降酶复方和辨证代表方对模拟临床病证相合肝损伤动物模型的治疗研究， 探讨两类处方抗肝损伤的作用机制和优劣势。方法：清洁级Wistar雄性大鼠105只，酒精灌胃造模的同 时，按照湿热内蕴造模方法制造出复合模型，分别予以中医经典代表方、辨病专方、辨病专方加减方治 疗。比较各组治疗效果。从微观角度分析维肝降酶复方治疗酒精性肝病的优势与机理，并发现不足。结 果：成功复制出肝胆湿热型酒精性肝病病症相合大鼠模型：维肝降酶饮、维肝降酶饮加味、辨证方剂对 低GGT、FFA、肝脏结构的改变等方面龙胆泻肝汤合茵陈蒿汤组有较为明显的作用；在降低TNF含量和 瘦素水平方面，维肝降酶饮加龙胆草车前草组有着较好优势，而病理组织学检查中，维肝降酶饮较其他 组有较好的优势。结论：。。证实维肝降酶饮湿热内蕴证型中：改善大鼠的=般状况．、降低血清本斌甘酸氨 基转移酶和谷氨基转移酶的含量、降低血清自由基含量、提高血清SOD和GSH活力、降低TNF含量和 瘦素水平、减少肝组织CDl4表达等等方面疗效确切，从而起到减轻肝细胞炎症，保护机体的作用。 I关键词】病症相合动物模型；肝胆湿热；酒精性肝损伤；辨病论治；辨证论治 材料与方法 一、材料 (一)动物与饲料 健康Wistar大鼠100只，雄性，体重2009+209，全价营养鼠饲料和高脂饲料：。 (二)药物 ①维肝降酶复方组成：生甘草、栀子、田基黄、青皮、赤芍、枸杞、决明子、白术、熟军等。 ②维肝降酶加龙胆草车前草组：维肝降酶复方加龙胆草、车前草。 69、当归(酒炒)39、生地黄酒炒)99、柴胡6昏生甘草69、车前子99、茵陈249。 制备方法先将每个组方药材混合，加入8倍量的水浸泡半小时，煎两次，每次l小时，两次水煎液混合， 浓缩至相应浓度，lOOml／袋密封，．20C保存，用前放置至常温给药。 二、方法 (一)动物模型的建立 大鼠适应性饲养3d后进行初步筛选，分为2组，空白组和模型组。模型组第一周均用56％北京二 精的顺应性，减少死亡率。第二周开始以1．5mL／1009剂量每日早晨灌胃1次，至第四周。模型组给酒后 并饲以高脂侧料，自由饮水；空白组灌胃同体积的生理盐水，饲以普通饲料，自由饮水。于第四周末计 数模型组死广16只，从剩余72只大鼠中随机抽取6只大鼠，处死后取肝脏做病理学检查，确定造模成 功与否。 652 会议交流其他 (二)动物分组及处理 加龙胆草车前草组(16只)，龙胆泻肝合茵陈篙治疗组(16只)。 从第五周开始灌胃给药(10ml／kg)，空白组给予同体积水，连续给药4周。给药至第七周时，温度 一次给药后，禁食不禁水12小时。 (三)动物用药 按大鼠临床等效量换算(体表面积换算法)：维肝降酶组，成人一日总给药量：1029，大鼠给药量： 制浓度：0．8919／mi。 (四)标本采集 第八周末，每组随机抽取8只，麻醉取血处死，称肝、脾湿重，所取血液离心取血清，进行相关指 标的溅定一在肝组织同一部位剪下-d,块称重后用于做组织匀浆，测定肝脏中相关指标。剩余肝组织允 成两份，一份10％甲醛固定进行病理组织学检查，一份中性10％甲醛固定进行免疫组织化学检测。自每 组剩余大鼠中抽取3只，快速剥离肝组织，4％戊二醛固定后进行电镜检查。 (五)观察项目 1．动物一般情况。 3．肝组织匀浆指标检测：MDA，SOD，GSH含量。 4．肝组织病理学观察：HE染色、普鲁氏蓝染色及PAS染色。 5．免疫组化观察。 6．．透射电镜观察。 (六)统计学分析 for 将所得数据输入Excel，经SPSSl6．0Windows统计软件处理，数据结果以±s表示。计量资料采 用单因素方差分析。 结果 一、动物的一般情况及肝脏脏器系数 表1造模对大鼠体重的影响(叉±S)