食品中大肠埃希菌O157的检验及方法探讨.pdfVIP

维普资讯 1208 中国卫生检验杂志 2008年6月 第 18卷 第6期 ChineseJournalofHeahhLaboratoryTechnology， Jun2008：Vol18 N。6 【经验交流】 食品中大肠埃希菌0157的检验及方法探讨 柳建强，王建红，王东方 ，陈洪永 (河北省唐山市疾病预防控制中心 ，河北唐山 063000) [关键词] 食品；大肠埃希菌0157；检验；方法 [中图分类号] R155．5 [文献标识码] c [文章编号] 1004—8685(2008)06—1208—02 自从 1982年在美国发生了首次由大肠埃希菌 0157：H7 1．4．3 显微镜观察 挑取可疑菌落进行革兰染色、镜检。 引起的出血性肠炎暴发以来，该菌在世界范围内曾有过多次 1．4．4 生化及血清学鉴定 挑取可疑菌落转种三糖铁琼脂斜 食源性暴发。1996年在 El本发生的人类历史上规模最大的一 面，37~C培养 24h。将 3．5％氯化钠三糖铁琼脂斜面上层和底 次暴发，引起了全世界的关注 。目前大肠埃希菌 0157：H7 层均产酸、不产硫化氢的菌株做氧化酶试验，将阴性的菌株转 感染呈全球流行 ，已被认定是20世纪70年代以来新发现的8 种MUG—LST，于37~C培养箱中培养24h后 ，用 366nm长波 种传染病病原体之一 J。我国亦加强了大肠埃希菌0157：H7 紫外灯观察有无荧光产生。将无荧光的菌株用API20E生化 的监测 ，将该项指标列入国家食源性疾病监测网重点监测项 鉴定试条进行鉴定。同时用0157：H7标准血清做玻片凝集试 目之一。为了解唐山市食品被本菌的污染现状，我们于 2007 验 (用生理盐水做对照)。 年8月采集了40份熟肉制品进行食源性致病菌检测，分离出 了1株大肠埃希菌 0157：H7。 2 结果 2．1 菌落形态 1 材料与方法 在 SMAC平板上可见圆形、光滑、较小的无色菌落；在大 1．1 样 品 肠杆菌0157显色培养基上可见中等大小的紫色圆形隆起的 熟肉制品40份，2007年 8月份从唐山市八方超市 、华盛 菌落。 超市采集。 2．2 菌体形态 1．2 主要培养基及试剂 革兰阴性短杆菌。 mEC肉汤、山梨醇麦康凯培养基 (SMAC)、大肠杆菌0157 2．3 培养特性 显色培养基、三糖铁琼脂 、MUG—LST、营养琼脂等均购 自青岛 三糖铁琼脂斜面上层及底层均产酸为黄色，有气泡，不变 海博生物试剂有限公司；免疫磁珠及磁板购 自挪威 DynalBio— 黑 (不产 S)，穿刺线不呈直线 (有动力)。 techASAOslo；氧化酶试剂购 自杭州微生物试剂有限公司。 2．4 生化试验结果 1．3 仪 器及鉴 定试剂 从营养琼脂平板上取本菌做氧化酶试验，结果氧化酶试 BagMixer40O均质器产 自法国；显微镜产 自日本 OLYM— 验为阴性 。 PUS公司；366nm 长波紫外灯产 自美国Spectronics公司；API 将氧化酶试验阴性的菌株转种 MUG—LST，于37~C培养 20E生化鉴定试条购 自法国生物梅里埃公司；0157、H7诊断血 箱中培养 24h后，用 366nm长波紫外灯观察无荧光产生。 清及单克隆抗体均购自中国疾病预防控制中心传染病控制所。