HPLC法测定独子藤中雷公藤红素的含量论文.docVIP

　　HPLC法测定独子藤中雷公藤红素的含量论文 刘慧琼，李国成,卢绮雯,王定勇 【摘要】 目的建立高效液相色谱法测定独子藤中雷公藤红素的含量，为雷公藤红素的药用植物资源开发提供依据。方法 采用Supelco Discovery C18柱(25 cm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-5%(体积分数)H3PO4水溶液(体积比80∶20)，流速为1.0 mL·min-1，检测波长为426 nm。结果 雷公藤红素在40~200 μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 1)。独子藤中雷公藤红素的平均质量分数为0.055 5%，雷公藤红素的平均回收率为97.6%.freeline the content of tripterine in Celastrus monospermus Roxb by HPLC for developing the medicinal resources of celastrol.Methods An external standard method by HPLC n (25 cm×4.6 mm,5 μm) ployed.The mobile phase ethanol-5%(φ) phosphoric acid solution (80︰20) (ξ)at the floL·min-1.The detection .Results It shoL-1 (r=0.999 1).The content of tripterine in Celastrus monospermus Roxb ethod is simple and accurate,sensitive and reproducible and can be used in the quality control of Celastrus monospermus Roxb.The content of tripterine in Celastrus monospermus Roxb onospermus Roxb; tripterine; HPLC; assay 独子藤(Celastrus monospermus Roxb.)为卫矛科南蛇藤属植物，分布于我国福建、广东、云南、贵州、广西等省区及越南和印度等地，主要生长于海拔1 000 m以上的林带中1。研究表明独子藤的化学成分主要为生物碱和木栓烷型三萜类化合物，其中木栓烷型三萜类化学成分对风湿病、白血病和皮肤病均有较好疗效2。雷公藤红素为木栓烷型三萜类化合物，是雷公藤片、雷公藤多苷片等治疗类风湿病制剂的有效成分之一,主要来源于中药雷公藤的根皮，具有抗炎、免疫抑制及抗肿瘤等多种药理活性3。中美科学家于2006年联合发现雷公藤红素的抗癌新机制4，引发了雷公藤红素抗癌活性研究的热潮。我们在独子藤的化学成分研究中发现该植物根中富含雷公藤红素，是一种潜在的雷公藤红素植物资源,具有重要开发价值。但至今尚未见有关独子藤中雷公藤红素含量测定的文献报道。本文建立了独子藤中雷公藤红素的含量测定方法，对合理开发独子藤植物资源、促进雷公藤红素的深入研究,均具有重要意义。 1仪器与试药 1.1仪器 Shimadzu LC-10AT型高效液相色谱仪(日本岛津公司)，SPD-10AT型紫外-可见检测器(日本岛津公司)，Hillipore溶液过滤器;Millipore 0.45 μm滤膜;AY120电子分析天平(Shimadzu公司);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。 1.2试药 雷公藤红素对照品(自制，经HPLC法测定纯度≥98%);独子藤于2008年10月采自广东省阳春市，由广东药学院李书渊教授鉴定为独子藤Celastrus monospermus Roxb.;硅胶(柱层析硅胶，青岛海洋化工有限公司);甲醇为色谱纯;水为超纯水;其余试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱：Supelco Discovery C18柱(25 cm×4.6 mm，5 μm);流动相：甲醇-体积分数5%H3PO4水溶液(体积比80∶20);流速：1.0 mL·min-1;检测波长：426 nm;柱温：25 ℃;进样量：20 μL。色谱图见图1。 2.2对照品贮备液的制备 精密称取雷公藤红素对照品5.0 mg，置25 mL容量瓶中，加适量甲醇溶解并定容，摇匀，得到质量浓度为0.20 mg·mL-1的雷公藤红素对照品贮备液。 2.3供试品溶液的制备 取独子藤药材适量，粉碎过40目筛，精密称取10.0 g，装入100 mL带塞三角瓶中，加入三氯甲烷超声提取3次，每次50 mL，每次30 min。静置，滤取上清液，旋转蒸发仪上浓缩至干。称取4.0 g硅胶装柱(1.5 cm×