常压高浓度氧对新生鼠血小板cd62p表达及脑和肺sod mda的影响-effects of atmospheric high concentration oxygen on platelet cd62p expression and sod mda in brain and lung of neonatal rats.docxVIP

常压高浓度氧对新生鼠血小板CD62P表达及脑和肺SOD、MDA的影响本实验拟通过建立常压高浓度氧氧中毒的新生鼠模型，用流式细胞仪检测其常压高浓度氧对新生鼠血小板CD62P表达及脑和肺SOD、MDA的影响本实验拟通过建立常压高浓度氧氧中毒的新生鼠模型，用流式细胞仪检测其 全血中血小板膜糖蛋白CD62P的表达，并检测其脑组织和肺组织的SOD和MDA 的含量，探讨氧自由基及血小板活化在高氧损伤中的作用机制，为临床合理用氧 及防治氧中毒提供实验依据。方法1．正常健康出生12d时内的昆明小鼠分成高氧组和对照组，每组5窝，每窝8R。高氧组置于密闭氧箱中，持续输入氧气，氧浓度大于或等于90％，钠石灰 吸收二氧化碳。温度，湿度恒定。每天定时开箱1小时，添加水、饲料及更换垫 料。对照组的小鼠置于同一空气中，饲养方法与高氧组相同。2．分别于通气1天，3N，7天，14天，2l天，小鼠断头取全血0．5ml，用EDTA-Na1：9抗凝，流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白CD62P的表达。3．断头处死后的新生鼠，完整剥离脑组织和肺组织后，取右侧脑组织及右肺 组织制作脑匀浆和肺匀浆，于．30。C冰箱保存待测。最后脑和肺组织匀浆用黄嘌 呤氧化酶法测定SOD，硫代巴比妥酸法测定MDA。4．左肺和左脑置于10％福尔马林液中保存固定，经脱水、石蜡包埋、切片及 HE染色光镜下观察组织学的改变。结 果1．高氧对新生鼠一般状况的影响 新生鼠高氧暴露5天后，有的新生鼠随着每日开箱后氧浓度的下降开始逐渐出现呼吸急促，皮肤苍白和不同程度的发绀等表现，这些改变出现的时间和表现程 度因个体而不一，但在恢复高氧后基本可缓解。随着高氧暴露时间的延长，越来越 多的新生鼠出现这些离高氧后的异常表现并且程度逐渐加重，严重者在7～10天 后出现头颤，发绀加重，甚至出现下颌式呼吸，恢复供氧后，上述症状虽可有所缓解，但仍表现出活动少反应差，精神萎靡，毛发欠光泽，吸吮能力差等。而对照组新生鼠则活动好，反应灵敏，肤色红润，毛发光泽，无以上异常表现。 2．肺的病理改变高氧组新生鼠在高氧吸入后1天时肺组织与空气组无明显差另tl；3天时可见小儿常压高浓度氧对新生鼠血小板CD62P表达及脑和肺SOD、MDA的影响血管扩张、充血和肺泡内少量出血，以中性粒细胞为主的渗出、问质内细胞增多；7常压高浓度氧对新生鼠血小板CD62P表达及脑和肺SOD、MDA的影响血管扩张、充血和肺泡内少量出血，以中性粒细胞为主的渗出、问质内细胞增多；7 天时仍可见肺泡内出血、间质水肿、炎症细胞浸润、间质细胞明显增加，有的表 现为肺间隔变薄，有的肺组织正常结构局灶性破坏致肺结构紊乱，同时发现终末气 腔明显扩张、小肺泡数量减少，提示肺的正常分化发育受阻；14天,}1321天间隔更薄， 小灶或多灶状实变，肺组织正常结构破坏，终末气腔扩张更为明显、小肺泡数量更 少。3．脑的病理改变高氧组各时间点处死的大鼠脑外观与对照组相比无明显充血、水肿、出血、 萎缩等异常变化。光镜下：1天高氧组和对照组无明显差别。3天高氧组与对照 组相比，高氧组脑毛细血管出现明显的扩张充血，有大量红细胞浸润，脑血管周 围间隙增宽，有大量炎细胞浸润。光镜下脑组织较疏松，呈海绵状结构，细胞核 旁空间变宽，过量液体堆积于胞内或细胞间，可见脑细胞间隙增宽。并且随吸氧 时间延长，病理切片示脑损伤加重。7天高氧组发现脑细胞坏死，并出现小胶质 细胞结节。14天和21天高氧组病理损伤加重，细胞坏死明显。4．月市组织中MDA含量及抗氧化酶SOD活性的动态变化 吸氧1天，高氧组MDA水平(29．83土6．19 nmol／mg)虽高于对照组(25．634-5．54nmol／mg)，但差异无显著性(PO．05)；吸氧3天，高氧组MDA水平(54．934-5．53 nmol／mg)明显高于对照组(22．384-4．36 maaol／rag)，有显著性差异(PO．05)；吸氧7天，高 氧组MDA水平达高峰(93．864-13．94 nmol／rag)，并持续至14天(85．364-10．54 nmol／mg)；至吸氧2l天(48．654-7．19 nmol／mg)虽明显下降，但其含量仍高于对照组 (26．13士4．12 nmol／mg)，差异有显著性(PO．05)。随吸氧时间的延长，高氧组与 对照组SOD的活性均逐渐增高，但两组比较差异无显著性(PO．05)。5脑组织中MDA含量及抗氧化酶SOD活性的动态变化吸氧1天和吸氧3天，高氧组MDA水平(高氧组1天为11．744-1．28 nmol／rag；3天为12．984-1 93 nmol／m卫)虽然高于对照组(对照组1天为10．614-2．11 nmol／mg：3天为12．224-1．06 nmo|／mg)，但差异无显著性(PO．05)；吸氧7天，高氧组M