果胶复合酶生产及其在亚麻脱胶中应用.docVIP

果胶复合酶生产及其在亚麻脱胶中应用 　　文章介绍了以黑曲霉HYA4为菌种,采用固体发酵方法生产果胶复合酶的方法。通过测定脱胶过程中果胶酶、半纤维素酶活力及脱胶周期,确定脱胶的适宜条件。工艺优化后脱胶周期可缩短至 22 h,麻茎失重率与温水脱胶的相当,脱胶液可重复利用 4 次。 　　This article discussed the production of the pectin compound enzyme by solid state fermentation with aspergillus niger HYA4. By detecting the activity of pectinase and hemicellulase and the retting-period, the optimal retting-condition was determined. Under these optimal conditions, the retting-period can be reduced to 22 h, the weight-decreasing ratio was the same as the natural-retting, and the enzyme liquor could be recycled by four times. 　　 　　亚麻是重要的纺织原料作物,亚麻纤维制品吸湿散热快、透气性好、挺括,广泛用于服装服饰等行业,颇受消费者的喜爱。然而亚麻脱胶是一个复杂的生物化学过程,不仅仅是果胶物质的部分分解,还伴随着半纤维素、木质素等其他非纤维物质的部分降解,麻纤维的优良性能是否得到充分发挥,与其脱胶好坏有着直接的关系。脱胶效果对单纤维理化性能、纺纱工艺和成纱质量以及织物风格、服用性能等都有十分重要的意义。由于传统的亚麻脱胶方法存在脱胶周期长、对环境污染严重以及纤维品质不稳定等弊端,人们一直努力寻找现行亚麻脱胶的替代方法。将微生物产生的酶类应用于亚麻脱胶,可以改善纤维的品质、缩短脱胶周期、减少废水排放量,具有广阔的应用前景。20世纪80年代以来,国外学者开发了用于亚麻脱胶的复合酶,但由于生产成本过高及纤维强力损失较大等原因,至今仍处于实验室研究阶段。我国对亚麻脱胶研究起步较晚,目前的研究主要集中在细菌脱胶方面,但细菌脱胶培养条件较严格、操作繁琐,很难实现工业化生产。本文对黑曲霉生产的果胶复合酶用于亚麻脱胶的工艺进行了探讨。 　　 　　1实验材料与方法 　　 　　1.1实验材料 　　亚麻:由黑龙江省金鼎亚麻纺织集团提供;沤麻用水:取自嫩江;菌种:黑曲霉HYA4由齐齐哈尔大学生命科学与工程学院生化工程实验室保藏;主要试剂:果胶和木聚糖为sigma公司产品。 　　1.2实验方法 　　(1)培养基及培养条件 　　① 斜面活化培养基:PDA培养基,去皮马铃薯 200 g,切成小块,加 1 000 mL水煮沸 30 min,双层纱布过滤成清液;加水至 1 000 mL,然后加入琼脂 20 g,葡萄糖 20 g完全溶解,pH值自然。② 固体发酵产酶培养基:麸皮 10 g,豆粕 2.5%,NaNO3 3.5%,(NH4)2SO4 1.0%,加水量 10 mL,121 ℃灭菌 20 min。③ 培养条件:250 mL三角瓶装料 10 g,起始pH值 5.0 ～ 5.5,培养温度 32 ℃,培养时间为 96 h。 　　(2)脱胶用粗酶液的制备 　　固体发酵后向培养基中以 1∶25(w/v干曲)加入江水,室温浸提 3 h,8 层纱布过滤即得粗酶液。 　　(3)亚麻的酶法脱胶 　　① 亚麻脱胶方法:将亚麻原茎剪成长 20 cm的茎段,称取 150 g,加入自制脱胶瓶中,自来水浸泡 8 h,取出麻茎淋出水分,按浴比 1∶10 加入粗酶液,36 ℃恒温静止脱胶。② 脱胶液重复利用的方法:将固体发酵浸提所得粗酶液用于脱胶,至脱胶终点时取出麻茎,剩余脱胶液全部用于下一批次脱胶,不足量以江水补充,循环使用。 　　(4)酶活力的测定,采用 3,5 ?C 二硝基水杨酸法(DNS法)。 　　(5)脱胶终点的判断:采用抽茎法。 　　(6)脱胶后麻茎失重率的计算(重量差法)。 　　2结果与讨论 　　2.1天然温水脱胶过程中酶活力的变化 　　果胶和半纤维素是亚麻脱胶的主攻对象,脱胶液中果胶酶、半纤维素酶活力的高低直接影响亚麻脱胶周期和打成麻的质量。对天然温水脱胶过程中果胶酶和半纤维素酶活力进行测定,结果如图 1。 　　 　　由图 1 可见,天然温水脱胶液中果胶酶的活性较高,而半纤维素酶活力较低。果胶酶活性呈现出由低到高再逐渐降低的变化趋势,脱胶 60 h时达最高值,然后缓慢下降。而半纤维素酶的