细胞周期与细胞同步化.docx

r _ __ J 奈 第八章 綸 如胞周期与细胞同步化 培养的有机体细胞的增生与体内细 胞一样，也是借助于细胞有丝分裂 而实现的。 尽管建立了细胞株，获得了细胞克隆， 但这些细胞的生命周期并不是完全同步 的，即在某一时间只有少数细胞进行着 有丝分裂活动，表现出细胞分裂的不同 步性。 在研究工作中，除了要调节细胞的培养 环境，为之创造与机体内细胞基本相同 的生存条件，还要研究细胞内调控，使 之按照人的意愿生长或合成产物。 ?体外培养的细胞各自处于细胞周期的 不同阶段，具有分裂不同步性，只有 使细胞周期同步化，获得大量同周期 阶段的细胞，才能更深入的研究细胞 状态和生化特点，便于进行细胞动力 学和其他有关实验。 ?细胞同步化的实验是以细胞周期理论 为基础的。 ? 一、细胞周期 ?自20世纪50年代细胞周期学说建立后, 人们对培养细胞的增殖过程和周期规律 已有了很深的了解。 ?整个细胞周期经历两个时期，即分裂间 期和有丝分裂期，分裂间期也是细胞生 长阶段，是为有丝分裂过程做准备的， 近些年又将间期分为Gi期（DNA合成 前期）、S期（DNA合成期）、G2期 （DNA合成后期）。 MITOTIC CYCLE 绰号塑Ms治 M G2 I G 町 2 G1 一 Gap 1 s DNA synthesis 细胞周期小意图 Gi期 时期：子细胞继续生长时期 时间：变化大，几小时~几天 特点：细胞生长主要阶段 能对各种环境信号,综合、协调、作出反 应以補定是否进入S期 ■ 41时间长度变异大：人体200多种细胞， 周期时间不同，主要在G1 ■ 41 如：胚胎早期卵裂细胞几乎测不到 淋巴细胞 数小时 神经元细胞 终生停在G1期 楫况 时期:DNA合成肘期 基本特点:为分裂作准备,DNA复制 时间：约10h左右 DNA合成时期是遗传物质易受致突变物 损伤的时期 特点 ■ ■■⑴主要为DNA合成（DNA复制） 开始时，急剧形成DNA聚合酶 及4种脱氧核昔酸以后，DNA加倍 ■ ■■ DNA复制是增殖的基础 完成DNA复制，才能入M期. f （2） S期的蛋白质合成 DNA复制过程中需不断合成蛋白质 如阻断蛋白质合成（加入抑制合成蛋白质 药物如喋吟霉素）将同时影响DNA合成速 度，组蛋白的合成与DNA合成也有关，如 抑制DNA合成（加入抑制DNA合成药物如羟 基脈、 阿霉素）也出现组蛋白合成阻断, DNA复制中，DNA和组蛋白互为条件、相 互制约。 G2期 概况: 时期:分裂之前 基本特点：进行诱发细胞逬入分裂的 各种生化变化 时间：较短，约2?3hr 特点： 机能活动为分裂作准备 继续合成与分裂有关的物质 主要合成分裂有关的蛋白质 尤以细胞骨架，重新组装的蛋白质, 如阻止蛋白质合成，细胞不进入分裂 此期DNA已加倍，染色质开始螺旋化, 但程度轻。 II 时期 最终阶段 基本特点形态、结构变化最大, 细胞增殖标志 时间 短，较恒定 分期 前、中、后，末 1 .染色体组装:染色质疑集，M期开始核膜破裂，已成染色体2. 1 .染色体组装:染色质疑集，M期开始 核膜破裂，已成染色体 2.核被膜破裂 核被膜消失, 前期结束 前期 染色质厥集，核被膜崩解纺缠体形成20?30分 特点 分裂前须先染色质组装成染色体 染色质逐渐变短，变粗 3.纺缠体形成 中心粒:2套中心粒分离，向两极移动成为纺绣 体的两个极.是微管组织中心 纺缠体：中心体向两侧移动中，微管聚合，成纺 绣状结构，由三种微管组成 星体微管：卧放射状 极微管：由纺绣体一极发出，伸向另一极， 在赤道部位相互重叠，由动力蛋白连接 动粒微管：由一极发出， 与染色体的动粒连接 中期 概况： 要点：纺塩体及赤道形成时间：2 0 ~ 3。分 特点： 有丝分裂器：由纺雄体、染色体、中心粒 组成的临时装置 纺缠体：已形成，稳定 染色体：高度浓缩，形成赤道板 如不能形成赤道板细胞不能进 入后期。 细胞形状：圆形、易脱落 要点:染色单体分离.后期开始时间:5?7min最快特点:使染色体向两极移动（拉动） 要点:染色单体分离.后期开始 时间:5?7min最快 特点: 使染色体向两极移动（拉动） 染色体向两极移动，染色体动粒部 位不断解聚。使动粒微管缩短 极微管：加速聚合、伸长，使相 匿叠的部分产生滑动， 使纺座体两极之I冋距离加大， 雄体延长（推动） 形状略变长 末期 要点:细胞质分裂，形成2个子细胞 时间:20?30min 特点胞质中重新出现正常结构 纺绣体消失，新的细胞核膜形成 形成染色质：染色体解螺旋化 胞质分裂 形成特殊临时性结构一收缩环 気 细胞膜内陷，分裂沟… * r J UZ 歧 缪 盆胞拉长中部变细，缩窄加深, / 2个子细胞 二、细胞同步化 ? 在一般培养条件下，群体中的细胞 处于不同的细胞周期时相之中