EB病毒的检测方案设计.pdfVIP

EB病毒的检测方案设计 目录 1.概述1 2.临床病例2 3.检测方案2 3.1标本类型2 3.2标本采集及要求2 3.3标本接收2 3.4标本处理3 3.5标本检测流程3 3.5.1仪器准备3 3.5.2试剂及材料准备3 3.5.3检验原理4 3.5.4操作步骤5 3.6结果判断6 3.7检测结果7 3.7.1结果审核8 3.7.2结果分析8 3.7.3标本保存与处理9 4.结论 9 EB病毒的检测方案设计 1.概述 EB病毒是一种DNA病毒，按物种分类法分属疱疹病毒科的嗜淋 巴细胞病毒属，一般认为人和灵长类动物易感此病毒，当机体感染此 病毒后，病毒主要攻击B细胞。与EB病毒的感染与Burkitt淋巴瘤、 鼻咽癌、传染性单核细胞增多症、儿童恶行淋巴瘤等人类恶性肿瘤密 切相关，因此被列为高致癌的人类恶行肿瘤病毒。人是此病毒的感染 宿主，传染源是病毒携带者和患者本身。通过口密切接触传播，当机 体感染EB病毒后病毒先在口咽部上皮细胞大量增殖，随着增殖数量 的增加逐步感染和攻击B细胞，这些携带了病毒的B细胞随着血液循 环到达全身各个组织脏器而导致机体发生全身性感染。当然B细胞作 为我们机体介导体液免疫应答的细胞可以定植于人体的淋巴组织中， 甚至可以长期潜伏下来。所以当被感染的B细胞进入血液时机体表现 为增殖性感染，被感染的B细胞在淋巴组织时机体表现为潜伏性感 染。青春期一次性感染大剂量的EB病毒可导致机体患传染性单核细 胞增多症，临床以发热、咽炎、颈部淋巴结炎，外周血淋巴细胞增多 等临床表现为特征。此外，EB病毒与鼻咽癌的发生存在密切相关， 临床循证医学证实所有鼻咽癌患者癌组织切片中都有病毒基因组的 表达和EB病毒抗原抗体检测阳性。所以采集咽部分泌物或者血液样 本进行抗原抗体检测是EB病毒诊断机体感染EB病毒引起各种疾病的 重要方法和依据。 2.临床病例 患者谢某，女，68 岁，汉族，湖南宁远人,患者自诉1 年前无明 显诱因出现头昏头痛，患者院外曾多次去当地卫生院输液治疗，治疗 效果不佳，近1 月来症状加重并出现有右耳闷塞感，伴有疼痛、听力 下降，患者自行去宁远当地医院做检查，因未发现异常，未作特殊处 理。后疼痛未见缓解，遂予以前往我院就诊，行CT 考虑鼻咽部占位， 拟 “鼻咽壁恶性肿瘤”收入院治疗。起病以来患者精神状态较差，纳 差未进食，无大小便失禁。为进一步明确是否为EB病毒感染所致的 鼻咽癌，临床科室申请EB病毒检测。 3.检测方案 3.1 标本类型：血液 3.2标本采集及要求： ①采集标本前应按照操作规范仔细核对患者的姓名、性别、年龄及检 查项目。 ②用普通红色真空管(不含抗凝剂)或含有分离胶的真空管采血至少 ３毫升。采血前禁止用药、需要心平气和禁止运动；抽血前一天需要 饮食清淡，勿食油腻、勿吸烟、酗酒，睡眠充足不熬夜。 3.3标本接收：由专业人员及时送检，尽量减少误差 ①接收前：查看血液标本是否符合检验要求。对不合格的标本如有血 凝块或标本量不足、标本有严重溶血或脂血这些情况的话应与临床联 系询问原因，一同协商处理。 ②接收后：已接收样本中，发现不合格样本时，查看患者检查的项目， 考虑是否有退回重抽的必要，若有必要需通知该科室负责人重新抽 取。 3.4标本处理： ①对合格的标本应尽快分离血清或血浆，转速不宜太快以避标本发生 溶血，血清标本最好及时检测。对于不能立即测定的标本离心后放入 2~8℃的冰箱里保存，于２～３天内完检验。 ②标本送到科室，接收后。需要放入离心机中配平离心7min，转速 4000r/min，离出血清或血浆,待离心机停止后取出标本。 ③编号、扫描到电脑里面。 3.5标本检测流程： 3.5.1 仪器准备：ST360酶标仪、半自动洗板机、生物安全柜、孵育 箱等。 3.5.2 试剂及材料准备: ①同昕生物技术 （北京）有限公司生产的EB病毒核衣壳抗原 （VCA） IgA抗体检测试剂 ②同昕生物技术 （北京）有限公司生产的EB病毒早期抗原 （EA）IgA 抗体检测试剂 ③同昕生物技术 （北京）有限公司生产的EB病毒Rta蛋白抗体IgG 检测试剂 ④一次性的橡胶手套、一次性的薄膜手套、加样枪、加样枪枪头、废 液桶。 3.5.3 检验原理: ①(VCA）IgA抗体检验原理：是采用的间接酶联免疫吸附测法