粮食与食品微生物学 课件 7.1 微生物生长量的测定.ppt

第三章 微生物生理学 知识点一：微生物生长量的测定 第三节 微生物生长 微生物从外界吸收营养物质，通过代谢，就开始生长、繁殖——保证微生物获得巨大数量的必要前提 微生物生长与其他高等生物相比，有特殊性（体现在什么地方？） 一、微生物生长的特殊性 一个微生物细胞 合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用 个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加 如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。 群体内各个个体的进一步生长 群体的生长 微生物生长的特殊性 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖 个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈代谢，原生质与细胞组分的增加为个体生长。 群体生长——群体中个体数目的增加。可以用重量、体积、密度或浓度来衡量。（由于微生物的个体极小，所以常用群体生长来反映个体生长的状况） 群体生长=个体生长+个体繁殖 研究微生物生长繁殖规律的重要意义 微生物利用或控制与微生物的生长繁殖或抑制有关 二、微生物生长量的测定 微生物生长 量的测定 数量测定 显微镜直接计数法 稀释平板菌落计数法 比浊法 称重法 含N量测定法 DNA含量测定法 ATP含量测定法 代谢活性法 重量测定 细菌、酵母菌等细胞数 霉菌、放线菌孢子数 原生质含量 （一）微生物数量的测定 1、显微镜直接计数法 方法：使用血球计数器在显微镜下直接计数。 优点：操作简便，计数直观。含死、活细胞（孢子） 要检查活的，需要染色，如酵母菌经过美兰染色后，活细胞无色，死细胞蓝色 2、稀释平板菌落计数法 对样品稀释培养，据形成的菌落数计数。 优点：传统计数方法，对设备要求不高。 10-3 10-5 10-4 3、比浊计数法 根据细菌悬浮液的吸光度测定其数量——在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比 无色的微生物悬浮液 波长：450-470nm 优点：简便，直接。 连续跟踪 不必取样 （二）微生物重量的测定 1、称重法 方法：用离心或过滤的方法将菌体从培养基中分离、冼净后，称湿重或干重。 优点：简单可靠。 一般液体培养物中，细胞浓度为2×109个/ mL 高密度培养物中，细胞浓度为4×109个/mL 2、含氮量测定法 方法：根据样品中菌体蛋白质含量计算微生物重量的 原理： （1）微生物蛋白质含量稳定 （2）氮是蛋白质的稳定成分 （蛋白质量=6.25×总含N量） 优点：测定准确。