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瓜果苋中的有机酸及酚酸类成分研究
楼:所有多年生野生动物的攀缘植物。它的水果(瓜)、种子(瓜)、果皮(瓜皮)和根(天花粉)都可以服用。这是中国常用的一种大药物。长期以来,瓜蒌瓤在瓜蒌皮及瓜蒌子药材生产加工过程中常以非药用部位而丢弃,造成了巨大浪费。古籍文献记载,瓜蒌瓤具有美白去皱作用。《名医别录》曰:“主胸痹,悦泽人面。
1 仪器、试药与仪器
AUY120型电子分析天平(日本岛津公司);紫外透射反射分析仪(ZF-6型三用紫外线分析仪,上海佳鹏科技有限公司);MP430全自动熔点仪(郑州明天仪器设备有限公司);Agilent 6540 UHD accurate mass Q-TOF质谱仪(美国Agilent公司);Bruker-600M AVIII核磁共振波谱仪(瑞士布鲁克公司);Agilent 1100 series 6320 ion-trap质谱仪;博纳艾杰尔CHEETA制备液相(博纳艾杰尔科技,色谱柱:Venusil
瓜蒌于2014年10月份采于济南市平阴禾宝中药材种植基地,经山东中医药大学郭庆梅教授鉴定为葫芦科栝楼属植物栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.的干燥成熟果实。样品稍微干燥,去除皮和籽,取瓤部分,冷冻干燥,粉碎,混合均匀,置干燥器内保存备用。凭证标本(GL保存于山东中医药大学A604实验室。
2 色谱-质谱条件
瓜蒌瓤原料4.5 kg, 95%乙醇浸泡提取3次,将提取液合并,浓缩,得乙醇浓缩液。药渣用95%乙醇回流提取3次,每次1 h,并趁热将提取液抽滤,合并,浓缩,得乙醇浓缩液。将乙醇浓缩液合并,旋转蒸发至无醇味,得乙醇浸膏约3.0 L。将所得乙醇浸膏分散到5倍量的水中,用醋酸乙酯萃取至无颜色,合并萃取液,减压浓缩,得到醋酸乙酯层浸膏107 g。
将醋酸乙酯层浸膏以甲醇溶解后,经硅胶柱色谱,依次用石油醚-醋酸乙酯(2∶1、1∶1、1∶2)、醋酸乙酯、醋酸乙酯-甲醇(2∶1、1∶1、1∶2)、甲醇依次进行梯度洗脱,以每500毫升为1个流分收集,并采用薄层色谱(TLC)监测,合并具有相同斑点的流分,回收有机溶剂,得到流分A (8.0 g)、B (7.6 g)、C (11.5 g)、D (10.4 g)、E (12.1 g)、F (5.2 g)、G (6.1 g),根据TLC结果,选取流分进一步分离。
A流分反复硅胶柱色谱,石油醚-醋酸乙酯(1∶1)为洗脱剂,得流分A1、A2,通过制备薄层色谱,得化合物1 (21 mg)和2 (36 mg)。B流分反复硅胶柱色谱,石油醚-醋酸乙酯(1∶1、1.5∶1、2∶1)洗脱,得流分B1、B2,通过制备薄层色谱,得化合物3 (18 mg)和4 (13 mg)。C流分聚酰胺柱色谱,二氯甲烷-甲醇(2∶1、1∶1、1∶2)梯度洗脱,采用TLC监测,合并具有相同斑点的流分,得化合物5 (10 mg)和流分C1、C2;C1流分经制备薄层色谱,二氯甲烷-甲醇(1∶1)为展开剂,显色2条色带,刮板溶解,再经凝胶柱纯化得化合物7 (17mg)和8 (27 mg);C2流分反复硅胶柱色谱,二氯甲烷-甲醇(1∶1、1∶2)为洗脱剂,洗脱物凝胶柱纯化得化合物9 (11 mg)、10 (12 mg)和11 (23mg)。D流分以反相C18中压色谱柱分离,以纯水及10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、75%、90%甲醇-水梯度洗脱,体积流量为10m L/min,每100毫升收集1个流分,每1流分减压浓缩,并采用TLC监测,合并具有相同斑点的流分,得流分D
3 m/zmsm/z,z/z135和3555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555555
化合物1:浅黄色液体,具有果香气;ESI-MS m/z:227[M-H]
化合物2:无色油状液体,具有芳香气味;ESI-MS m/z:277[M-H]
化合物3:无色油状液体,具有芳香气味;ESI-MS m/z:145[M-H]
化合物4:黄色油状液体;ESI-MS m/z:245[M-H]
化合物5:黄色油状物;ESI-MS m/z:436[M-H]
化合物6:黄色油状液体;ESI-MS m/z:603[M-H]
化合物7:黄色油状液体,有苦杏仁气味;
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