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山东省不同植被下土壤木霉生态分布特征 土壤微生物是生态平衡的重要组成部分。在环境和资源保护方面，对土壤微生物的研究日益有所增加，训练方法也不断完善，充分证明了微生物与环境的关系。木霉广泛存在于土壤,生存能力强,适应性广,具有对植物病原真菌的拮抗作用和强烈分解纤维素的能力,其重要的开发价值引起人们极大的兴趣和注意,对各种木霉的分离和作用已经有很多报导。笔者着重讨论有益微生物野生木霉在不同生态环境下的生存情况,为木霉在农业和环保上防治植物病害、改良土壤等的利用提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 马铃薯培养基 在山东省26个县市57个采样点,对40种不同植物植被、不同深度的土壤及其他附属物采集样品852份,晾干后装入纸袋带回实验室分离。采用马铃薯培养基PDA为生长培养基;PDA+L(乳酸)、改良马丁培养基Mardin+T.S(孟加拉红和链霉素)为分离培养基。0.1MPa蒸汽灭菌20min。 1.2 木霉分离培养 将土样用无菌水稀释,在摇床上摇匀,制成一系列浓度,用稀释平板法进行木霉分离。将待鉴定菌种接种于PDA平板培养,置25℃培养。并在光学显微镜下观察,进行木霉菌株鉴定。 1.3 数据分析的方法 木霉生态分布分析采用系统聚类法,以菌株数作为样品,木霉菌株数作为指标,原始数据不转换——欧氏距离——中间距离法,建立聚类图。 2 结果与分析 2.1 农田、食用菌的土壤水解反应 对山东不同地区不同采样点的852份样品进行分离分析,共分得木霉255株,木霉土样的采集环境分别为自然保护地、大田蔬菜地、温室保护地和大田农作物等,不同土壤生态环境土样稀释培养过程中,平板上木霉的分布量不同,常绿山林等有机质丰富的土壤中木霉含量大,在农田、食用菌土壤中木霉含量稍少,海滩、山脊、河沟边、路边的土壤中有机质少,植被很少,木霉量也稍少。依据木霉在不同土壤生态环境不同样品的数量进行聚类分析(见图1),当阈值T=2.114时,可将生态区分为五大类,分别为一般农作物土壤、贫瘠土壤、蔬菜和绿化地水分较足土壤、草地和温室及保护地水分充足土壤、有机质丰富的常绿山林。 2.2 农田各土样真菌分离 自然保护地常绿山林植被的土壤,常年有树木落叶和杂草,有机质含量多,木霉数量也多,土样稀释培养过程中,常绿山林的土样在平皿中木霉覆盖率80%以上,为2.04万个/g干土,占真菌总数的6.86%,分离的木霉菌株数量最多,为185株,占总数的72.4%(见图2);温室保护地土样在培养过程中其他真菌也很多,木霉菌株数为47株;市区绿化区的土壤经常被清理卫生,树木花草落下的有机质及时被取走,土壤中有机质含量少、木霉量少,为900个/g干土;农作物大田所分离的土样最多,但许多土样分离不到木霉;海滩、山脊、河沟边、路边的土壤中有机质少,植被很少,其他生物、微生物很少,木霉量也稍少;光板地更是少有木霉。 2.3 化肥和农药对温室花的添加量 不同植被的土壤所需的外援物质不同,土壤中木霉的数量也不同,保护地蔬菜、温室花卉,施用无机化肥和农药较少,其中木霉含量多;棉花、小麦等大田农作物,为了防病虫害和提高单位面积产量而施用化肥、农药多,木霉含量少(见表1)。由此说明土壤中化学农药、化肥使用越多,就会抑制木霉等有益微生物的繁衍。 2.4 不同土层的木霉采集 通过对山东省济南市英雄山不同海拔和不同土壤层进行木霉分离,木霉活跃的土层为5~10cm,这些土层透气性好,利于微生物的生长,采集到的木霉数量是18株,占总数的66.7%;海拔高度在40m以下,空气密度大,氧气充足,利于微生物的生长,也利于木霉的生长,木霉数量占总数的77.7%(见表2)。 2.5 不同立地条件下真菌的生存状况分析 不同土壤生态环境土样稀释培养过程中,平板上真菌生长的种类和数量差别很大,木霉的分布量也不同,常绿山林等有机质丰富的土壤中微生物含量多,木霉含量也大,海滩、山脊、河沟边、路边的土壤中有机质少,植被很少,其他生物、微生物很少,木霉量也稍少。从试验分析的土壤中发现,各种真菌的生存量与木霉的数量不成相关性,有些土壤中木霉含量很高,但真菌数量并不最高;有些土壤真菌数量较多,而木霉量却很少。 3 不同微生物生长和木霉用于土壤理化条件的研究 土壤微生物是土壤有机质转化的执行者,又是植物营养元素的活性库。土壤微生物对植物营养的有效性及其生态效应,国内外专家学者已经证明。本试验结果基本与前人的研究一致。在试验的基础上,笔者认为,木霉是一种有益真菌,其生存条件又与生态环境密切相关,木霉能改善土壤物化条件,提高土壤供肥保肥能力,拮抗有害微生物,能否利用木霉作为指示微生物来检测土壤的肥力;在现在充分发掘和利用有益微生物的同时,能否保存土壤中现有的有益微生物,并进一步利用;能否将土壤中的微生物研究其生理生化,有待进一步了解土壤生态平衡的机理,