营养物对新月组织培养的影响.docxVIP

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营养物对新月组织培养的影响 玫瑰是蔷薇科的一种花卉,来自中国。它是中国最早的花之一。月季于17世纪传入欧洲,现已遍布世界各地,目前世界上已有两万多个月季品种,种类数量居所有观赏花卉之首。 月季花容秀美、花色绚丽、芬芳馥郁、四季常开,故有“花中皇后”的美称。月季被多个国家选为国花,我国也有40多个城市将月季定为市花。 植物组织培养技术(以下简称组培)是应用无菌操作方法,培养植物的离体器官、组织或细胞,使植株再生的一种无性繁殖手段,此方法是在20世纪30年代才出现的。 对月季而言,虽然早在1980年Hasegawa就以攀援月季“Improved fire”的茎尖或休眠芽为材料,在MS培养基上建立了试管苗无性系,且其他一些研究者也先后用月季的茎尖和腋芽诱导出了完整的植株。但目前月季的繁殖技术依旧沿袭了传统的扦插、嫁接等方法,这些方法限制了月季的繁殖量,不能满足月季工厂化大生产发展的需要。故对月季组织培养技术的进一步研究及市场化是现在该技术发展的方向。 对于月季组织培养技术而言,茎段培养是最直接、最简便、成苗速度最快的一种手段,几乎所有研究组织培养的工作者都会利用这种培养方式。茎段培养的月季的再生方式是通过顶芽和腋芽的发育实现的,顶芽和腋芽在离体培养中都可被诱导而发育,单个的芽可萌发出单一的苗或多个苗。月季离体快速繁殖也可通过愈伤组织诱导不定芽的分化、体细胞胚胎发生、花药培养来实现。 随着月季组织培养技术的发展,研究者也探讨了影响月季离体快速繁殖的因素,发现这些影响因素不是单一的,其中主要影响因素有植物生长调节剂、外植体、培养基和培养条件4个方面,本文就目前国内外对这些影响因素的研究作一综合讨论。 1 细胞分裂素对变更生长素的作用 影响月季组织培养的植物生长调节剂主要有细胞分裂素(如BA、ZT、ZR、2iP、ip A和TDZ等)、生长素(如NAA、IAA和IBA)和赤霉素(GA3)3种。 细胞分裂素参与克服顶端优势的过程,因而能促进侧枝的萌发和生长,试管中嫩芽的繁殖主要是细胞分裂素影响的结果。 Bressan,P.H在研究“Gold Glow”侧芽的发育的影响因素时发现,采用6-BA含量为0.03~0.3mg/L的MS培养基时可促进“Gold Glow”侧芽的发育,但当BA含量超过0.3 mg/L则显著推迟芽萌发,毕艳娟也报道了低浓度的细胞分裂素(BA、ZT)有利于提高月季的萌芽率。 不同种类的细胞分裂素对月季茎增殖的影响也不同。C.A.M.Marcelis等在添加相同浓度(0.44μmol)的细胞分裂素BA、ZT、KT、ZR、2iP、ip A的各培养基上培养了“Sweet Promise”。其研究结果表明KT实际上对茎增殖没有多少影响;而BA、ZT、ZR都可显著促进茎的重量和长度增加;2iP和ip A虽也可促进茎的形成,但效果不如BA、ZT、ZR的明显。 细胞分裂素配合一定的生长素可共同促进月季侧芽的萌发与生长。在茎增殖阶段,配合细胞分裂素使用的生长素,最常用的是NAA。在6-BA质量浓度相同的情况下,随NAA质量浓度的升高(0.05~0.20 mg/L),月季小芽生长速度加快。但NAA用量同时会影响芽增殖速度,当NAA用量达0.1 mg/L以上时,芽增殖的速度有下降趋势。一般的说,培养基中BA和NAA两者浓度过低或过高均不利于试管苗的存活。 除NAA外,常用的细胞生长素还有IBA和IAA,它们对幼芽分化的影响是有明显差异的:在同样含有2mg/L BA的MS培养基上分别添加相同浓度(0.1mg/L)的IBA和IAA培养切花月季萨曼沙茎段、其幼芽分化百分率前者为80.0%,后者则为68.0%。 在培养基中添加GA3可促进幼苗茎的伸长生长,还对生长素和细胞分裂素的活性有增效作用:将月季嫩茎接种到附加2.0 mg/L的BA、0.1mg/L的NAA和2.0mg/L的GA3的MS培养基上培养5周后,芽增殖倍数达7.86,远远高于其他没有添加GA3的处理组合。 还有一类具有细胞分裂素活性的物质噻二唑苯基脲(TDZ),其促进芽繁殖的活性比细胞分裂素高得多。Anll Kumar等用分别添加TDZ(1.0或2.5μmol)和BA(1.0~12.5μmol)的培养基培养了Rose damascena,对比结果发现TDZ更能促进芽和茎的生长以及茎的伸长。同时Barna的研究表明5~10μmol的TDZ可以明显促进Rose hybrida L.的茎增殖。 在茎增殖阶段,细胞分裂素浓度过高对下一步的生根培养有影响,增殖用的BA含量愈高,对生根的抑制愈严重。在生根阶段,细胞分裂素对生根和移栽有抑制效应,使用0.3mg/L或更高浓度的2i P培养基进行月季组织培养,组培苗一般无法生根,即使2iP浓度较低时能形成一些根,在移栽时也会失败。因此,一般在月季生根培养

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