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牙全雌化育苗技术研究 它通常被称为比目鱼、牙齿和偏口，具有明显的雌性生长特点。1龄雌性比同龄雄性重约20%, 2龄雌性比同龄雄性重约50%以上。因此, 运用雌核发育技术培育全雌化苗种, 实现单性化养殖, 对提高牙鲆养殖产量和经济效益具有十分重要的意义。北戴河中心实验站2005年“牙鲆全雌化育苗技术研究”获得成功, 解决了异源精子受精、高温诱导伪雄鱼、低温培育提高雌性化比例以及伪雄鱼与普通雌鱼配组进行自然产卵等全雌化育苗关键技术问题。 2011年, 本站根据雌核发育原理, 采用细胞工程育种技术培育的牙鲆新品种“北鲆1号”被全国水产原种和良种审定委员会审定为国家级优良品种。该品种的雌性比例达90%以上;生长速度快, 13月龄和20月龄的个体比普通牙鲆生长速度分别快15.4%和23.4%以上;规格整齐, 互相残杀少, 成活率高。适宜在全国可完全人工控制的海水水域养殖, 目前已推广到辽宁、河北、山东、福建、天津等地养殖多年, 获得养殖户一致好评。 本文主要介绍制备牙鲆伪雄鱼繁殖全雌苗种的关键技术, 以帮助提高养殖者的生产技能和养殖效率, 达到增产增收的目的。 1. 伪金鱼的诱导养殖 实现牙鲆全雌化苗种生产的技术关键是制备“伪雄鱼”。“伪雄鱼”是指遗传上是雌性, 带有XX染色体, 而功能上为雄性, 行使雄鱼的功能, 能够产生精液, 也就是说伪雄鱼是能够排精的雌鱼, 是通过雌核发育和高温诱导制备而成。采集成熟的真鲷精液, 用林格氏液稀释50倍, 在30瓦紫外线灯下照射, 使其遗传物质失活, 然后与牙鲆卵子进行人工“授精”, 卵子被激活。受精3分钟洗卵后进行冷休克处理, 抑制第二极体释放, 使染色体加倍, 形成雌核发育二倍体。45分钟后转入16℃水中孵化。孵化后在仔鱼30～100日龄性腺分化时, 利用高温诱导 (28℃) , 则产生伪雄鱼。经过2～3年的培育, 性腺发育成熟, 与普通雌鱼交配, 即可获得全雌鱼。 2. 全成虫亲鱼培育 牙鲆和大多数鱼类一样, 其生殖活动受外部环境因素和神经内分泌的双重调节, 人为控制影响牙鲆性腺发育的环境因子如温度、光周期、水流及营养因子, 都能通过感觉器官的受体转变为神经传入, 而这种神经信息刺激下丘脑释放激素再作用于性腺, 便可准确地在特定季节开始性腺发育, 直至产卵。牙鲆是春季产卵鱼类, 卵母细胞的营养物质形成与蓄积过程正处于日照逐渐加长、水温逐渐升高的时期。在人工养殖条件下, 利用伪雄鱼做亲鱼, 人为改变光照和温度, 牙鲆就可以按人工控制的条件改变繁育时间, 从而促使全雌牙鲆由春季改变为秋季性腺发育成熟产卵, 进而实现反季节繁育, 并进行反季节苗种生产。因此, 全雌牙鲆亲鱼培育分正常季节和反季节促熟培育。 正常促熟培育是当秋季自然水温下降到8～9℃时, 停留数十日, 根据生产所需用卵时间设计控温、控光时间, 以逐渐延长光照时间、提高培育水温为主。反季节繁育是在夏季高水温期, 根据生产所需用卵时间, 利用机械制冷或深井水降温, 当开始降温时, 黑暗7天, 然后每天降温0.5℃, 到水温14.0℃, 保持温度不变;光照从每天12点开始, 采用日光灯照明延长光照时间促进性腺发育。 无论是正常繁育还是反季节繁育, 全雌牙鲆亲鱼培育都分为饲育期、性腺促熟期和产卵期管理。在饲育期, 亲鱼管理与成鱼养殖相同。全雌牙鲆亲鱼培育应加强性腺促熟期管理。亲鱼饵料添加营养强化剂, 以满足亲鱼积累卵黄物质的需求, 这直接关系到以后亲鱼卵质的好坏, 影响到苗种培育。反季节亲鱼促熟温度应控制在全雌牙鲆性腺发育适宜温度9～22℃, 最好在14℃左右。性腺促熟期可通过控温、控光来决定亲鱼产卵时间, 流水可促进性腺发育。 亲鱼培育密度以2～5千克/米2为宜, 雌雄体重比为1∶1。选择底面积为30～50米2的圆形、八角形、抹角方形的水泥池或玻璃钢水槽等做亲鱼培育池, 中间留排水孔, 外面用溢流法接卵。培育池用双层黑色遮光帘遮盖, 折光率为70%～90%, 用40瓦的日光灯照明, 每10米2安装一只, 距离水面0.5米, 光照强度500～1500勒克斯。投喂优质冰鲜小杂鱼或配合饵料, 每天投喂1～2次, 日投饵量为鱼体重的3%～7%。培育需用过滤水, 常流水。温度14℃以下时, 每天水交换量3～6次, 温度14℃以上时, 每天交换8次以上。每天清污吸底, 保持水质清新;越冬期水温不能低于5℃, 夏季高温期控制在25℃以下。 3. 保持常流水,预防产卵 亲鱼开始产卵后, 饵料中不再添加强化剂, 光照延续促熟期日光照时间, 温度如果可以人为控制, 保持在14℃左右, 如果是水温上升期, 可随着自然水温的上升而变化, 这个时期应加大流水量到每天交换10次以上。保持常流水, 一方面流水可以刺激亲鱼产卵, 另一方面也有利于卵子及时溢流到集卵网箱,