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女性妇女阴道乳酸杆菌感染因素分析 在这项工作中，我们调查了不同年龄、不同月经周期、不同感染状态和不同行为的影响，并研究了不同年龄下阴道乳酸杆菌的变化，以及不同感染之间的关系。 1 数据和方法 1.1 研究主题 2005年10月至2006年3月来我院妇科门诊进行体检的妇女,资料完备并最终进行统计学分析的共197例。 1.2 方法 1.2.1 传统妇幼保健查体情况 详细记录入选对象年龄、月经周期、社会行为因素(包括职业特点、受教育程度、居住情况、洗浴方式、吸烟、饮酒、性伴侣数、经期性交、经期清洗、阴道冲洗及冲洗频率)及常规妇科查体情况。 1.2.2 阴道侧壁真菌多样性检测 (1)用无菌刮板从阴道侧壁上1/3取得阴道分泌物,用pH 3.8~5.4 精密pH试纸测定阴道pH,涂盐水湿片一张,直接光镜检查,记录清洁度及有无滴虫。同时涂干片一张,直径约2cm ,厚薄均匀,在酒精灯火焰上加热固定,然后用Gram染色,显微镜下检查菌群、真菌、Nugent评分。(2)定量(0.1mL)取阴道侧壁上1/3分泌物,进行乳酸杆菌计数。(3)衣原体检测:取宫颈脱落细胞采用DNA - 聚合酶链反应( PCR) 方法进行检测。(4)人乳头瘤病毒(HPV)检测:取宫颈脱落细胞采用导流杂交法检测HPV及分型。 1.2.3 革兰染色及生化反应 将定量采集的标本用无菌生理盐水10倍稀释后,分别将各稀释度的标本液滴种到MRS选择培养基上,在37℃5%CO2培养箱培养48h后,挑取典型菌落涂于干净的载玻片上进行革兰染色,油镜下观察形态并通过生化反应鉴定到乳酸菌属。然后记录菌落数。所有标本在1h内完成接种。 1.2.4 阴道假丝酵母菌病 (1)细菌性阴道病(BV)实验室诊断标准:采用Nugent标准积分≥7分诊断为阳性。(2)外阴阴道假丝酵母菌病(VVC):有临床症状并显微镜检查见到假菌丝诊断为阳性。(3)滴虫性阴道炎:用生理盐水湿片法检查滴虫。 1.3 统计学分析 所得数据采用SPSS 12.0软件包进行统计学分析。计量资料均数(乳酸杆菌计数)用中位数表示。不同年龄组、不同月经周期、不同感染状态组间乳酸杆菌数量分布比较采用卡方检验。 2 结果 2.1 组患者1.097/l、1.0133/l、1.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512.512/l的情况 20岁、30岁、40岁不同年龄组间阴道乳酸杆菌的数量分布(1.0×107/L、1.0×109/L、1.5×108/L)有一定的差异,但差异无统计学意义(P0.05)。50岁年龄组中的8例研究对象,均表现为乳酸杆菌的缺失,且均存在不同的阴道感染。见表1。 2.2 不同月经期阴道乳酸杆菌的数量 增殖期、分泌期阴道乳酸杆菌的数量(5.1×1010/L、5.9×1010/L)差异无统计学意义(P0.05)。见表2。 2.3 阴道乳酸杆菌的数量分布 通过对研究对象的职业特点、受教育程度、居住情况、洗浴方式、吸烟、饮酒、性伴侣数、经期性交、经期清洗、阴道冲洗及冲洗频率进行单因素方差分析,结果显示,在以上各种不同因素影响下,阴道乳酸杆菌的数量分布差异均无统计学意义(P0.05)。 2.4 阴道假丝酵母菌的计数结果见表1.2,2.3;bv为3. 细菌性阴道病患者的阴道乳酸杆菌计数(4×106/L)明显比正常人(5×1010/L)减少,且差异有统计学意义(χ2=22.660,P﹤0.05)。外阴阴道假丝酵母菌病患者的阴道乳酸杆菌计数(1.3×107/L)也比正常人减少,且差异有统计学意义(χ2=10.413,P﹤0.05)。 但其检出率(42.1%)较BV患者(31.8%)高。HPV阳性和衣原体阳性患者阴道乳酸杆菌计数(3×1010/L、8×107/L)与正常人相比,差异无统计学意义(χ2=3.460,χ2=3.376,P0.05)。见表3。 3 讨论 3.1 阴道乳酸杆菌的年际分布 目前,阴道分泌物中已分离到29种微生物。其中最重要的是乳酸杆菌,它在健康女性的阴道排出物标本中分离率高达80%~100%。可通过产生乳酸、H2O2、细菌素样物质而对条件致病菌有拮抗作用,保护机体免受致病菌的侵袭。 随年龄增加, 女性雌激素分泌减少或停止, 阴道上皮细胞糖原储存减少或缺如, 衰老引起阴道菌群的演替最大特点是乳酸杆菌分离率明显下降, 阴道环境逐渐变成中性或弱碱性。绝经后妇女阴道内乳酸杆菌数量比绝经前明显减少, 相反B族链球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌升高。本次研究结果也显示,20岁、30岁、40岁不同年龄组间阴道乳酸杆菌的数量分布有一定的差异,但差异无统计意义。而50岁年龄组8例研究对象,均表现