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草决明种子萌发的nacl胁迫效应 草决明是草本植物。它具有清肝火、祛风湿、益肾明等功能。随着中医药的发展和对草决明的开发利用,对草决明的需求日益增加,发展草决明种植已成为必然趋势。 草决明具有耐旱、对土壤要求不严的特性。然而土地盐碱化日益严重,影响了种植业的发展和生态环境的改善。研究表明,当植物处于盐胁迫时,能通过诱导或抑制过氧化物酶的产生来适应环境,过氧化物酶的活性在植物的生长发育过程中不断发生变化,过氧化物酶活性的变化在一定程度上能反映出植物抗盐性的强弱。对草决明在盐胁迫条件下的研究国内外还未见报道。本文通过用不同浓度NaCl对草决明进行胁迫处理,测定其生长指标及其过氧化物酶的活性,分析草决明在NaCl胁迫下的生长和过氧化物酶活性的变化,为探讨草决明对盐胁迫的适应机制、扩大草决明种植规模、开发利用盐碱地提供理论依据。 1 材料和方法 1.1 材料表面 草决明种子2011年采于亳州。 1.2 实验方法 1.2.1 培养基的制备 挑选饱满且大小相同的草决明种子,用蒸馏水冲洗1次,用滤纸吸干种子表面的水分,然后播种在装有2层滤纸的直径为90 mm的培养皿中,每个培养皿放80粒种子,8 mL NaCl溶液(以蒸馏水处理作对照组),每处理3次重复,将培养皿放在培养箱内培养,温度:20℃;无光照。每隔24h记录一次发芽数,每天更换相应浓度的NaCl溶液,以保持胁迫条件,直至发芽数不变为止,计算相对发芽势、相对发芽率、发芽指数、相对发芽指数、相对盐害率。上述各指标计算方法参照董志坚、田伯红等。 1.2.2 酶活性的测定 (1)粗酶液的提取。取芽苗0.08 g,加2 mL 20 mmol/L KH2PO4和少量石英砂于研钵中研磨成匀浆,转入离心管中,再加2 mL 20 mmol/L KH2PO4冲洗研钵,转入离心管中,以4000 r/min离心10 min,收集上清液保存在4℃冰箱中。(2)酶活性的测定 。参照张志良等。取反应混合液3 mL,37℃水浴5 min。取光径1 cm的比色皿2支,其中一只中加入上述反应混合液3 mL,然后加入1 mL KH2PO4,作为校零对照组,在另一只比色皿中加入反应混合液3 mL,然后再加入上述酶液1 mL,立即开启秒表计时,在分光光度计470 nm的波长下测量OD值,每隔1 min计数一次,以每分钟的OD变化数值表示酶活性的大小,即用⊿A470/(min·mg蛋白质)表示。测3 min内的OD值。 1.3 处理数据 利用Excel软件处理数据并作图。 2 结果与分析 2.1 不同nacl处理对草决明种子萌发的影响 NaCl对草决明种子发芽的影响从图1~5可以看出,经不同浓度NaCl处理后,草决明种子相对发芽势、相对发芽率、发芽指数及相对发芽指数均呈下降趋势,而相对盐害率逐渐上升。但在50 mmol/L和100 mmol/L的NaCl的处理下,草决明的相对发芽势、相对发芽率、发芽指数和相对发芽指数虽低于对照组,但各数据之间的差异并不显著,说明50 mmol/L和100 mmol/L NaCl处理对草决明种子萌发的抑制作用不明显,即低浓度(≤100mmol/L)NaCl对草决明种子的萌发抑制作用较小,而在150 mmol/L NaCl处理下,各数据明显低于对照组,并与50 mmol/L和100 mmol/L NaCl处理的数据差异显著(p 0.05),表明在150 mmol/L NaCl处理下草决明种子的萌发受到明显的抑制,NaCl浓度100 mmol/L处为拐点,在250 mmol/L和300 mmol/L NaCl处理下的草决明种子萌发各项数据为0,说明高浓度(≥250mmol/L)的NaCl完全抑制了草决明的种子萌发。 2.2 牧草过氧化物酶活性 NaCl对草决明过氧化物酶的影响从图6中可以看出,随着NaCl的浓度增大,草决明种子在萌发的过程中,其过氧化物酶的活性呈先增大后减小的趋势。当NaCl浓度增大到100 mmol/L时,过氧化物酶的活性达到最大。 3 讨论 3.1 耐盐性测定 NaCl对草决明萌发的影响植物在种子萌发时期对盐胁迫最敏感,萌发期的耐盐性是进行植物早期耐盐性鉴定和植物品种选择的基础。利用种子萌发的各个指标对植物耐盐性强弱的鉴定已经在番茄和棉花上做了研究。本研究对草决明的相对发芽势、相对发芽率、发芽指数、相对发芽指数和相对盐害率进行分析,表明在不同浓度NaCl处理下,随着NaCl浓度的增加,盐胁迫对种子萌发的抑制作用逐渐增强,当NaCl浓度高于100 mmol/L时,草决明种子的萌发受到显著抑制。 3.2 盐胁迫对抗氧化能力的影响 NaCl对草决明过氧化物酶活性的影响过氧化物酶是一种广泛存在于植物体内的氧化还原酶,它能消除植物体内产生的自由基,避免自由基破坏细胞膜,提高植物的抗胁迫