牛大力对小鼠急性肝损伤的保护作用.docxVIP

牛大力对小鼠急性肝损伤的保护作用

牛鞭草madixmillottiaspecizae被证明为陆地草本植物。它也被称为祖母红茶和山莲藕。这是蝴蝶科植物的美丽凤爪枫milettiaspecihamp的干燥根。性味甘,平,功能补脾益气、强筋活络、清热解毒润肺。民间常用于治疗慢性支气管炎,慢性肝炎、咳嗽等。本文通过观察牛大力对四氯化碳及酒精所致小鼠急性肝损伤的保肝作用,为该药临床用药提供依据。现报道如下。

1材料和机器

1.1试验对象动物

SPF级KM小鼠,由广州中医药大学实验动物中心提供。合格证号:SCXK粤2003-0001。

1.2牛大力的干燥

牛大力,购于广州致信中药饮片有限公司,批号070701。药物制备:取牛大力干燥药材,用10倍体积的蒸馏水浸泡1h,加热煮沸2h,趁热过滤;残渣再加6倍体积的蒸馏水,加热煮沸1h,合并两次滤液,浓缩至1g生药·ml-1浓度备用,用时加蒸馏水稀释至所需浓度。

1.3苯双酯滴丸

四氯化碳(CCl4),广东光华化学厂有限公司,批联苯双酯滴丸,北京协和药厂产品,批谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒,丙二醛(MDA)试剂盒均购自南京建成生物工程研究所,批号20080419

1.4紫外分光光度计及用量

UNICO7200光栅分光光度计,尤尼柯上海仪器有限公司;WPABiowaveⅡ紫外分光光度计;LDZ5型离心机,北京医用离心机厂;AnkeTGL-16G高速离心机,上海安亭科学仪器厂;隔水式电热恒温水浴锅,上海跃进医疗器械厂。

2方法

2.1牛丁对ccl4引起的大鼠急性肝损伤的保护

2.1.1牛大力高、中低剂量单次给药组见表1

取KM小鼠84只,18～22g,适应性喂养3d后,随机分为6组,分别是空白对照组,模型对照组,阳性对照组,牛大力高(20g·kg-1·d-1)、中(10g·kg-1·d-1)、低剂量(5g·kg-1·d-1)给药组,每组14只。阳性对照组给予联苯双酯,给药剂量为45mg·kg-1·d-1,空白对照组和模型对照组给予等容积蒸馏水,灌胃给药1次/d,连续12d。

2.1.2ccl4小鼠血清指标检测

各组小鼠于末次给药后1h,除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外,其余各组各鼠均腹腔注射0.1%CCl4花生油溶液10ml·kg-1。小鼠腹腔注射CCl4后,禁食不禁水16h,眼眶静脉取血,3000r·min-1离心10min分离血清,取血清测定相关指标,同时处死小鼠,取肝脏、脾脏、胸腺并称其体重;取部分肝组织作相关检测。

2.1.3肝脏指数和胸径指数

血清按试剂盒所述方法测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT);按肝脏重量/体重(g·100g-1),脾脏重量/体重(mg·g-1),胸腺重量/体重(mg·g-1),分别计算肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数;并切取0.3g肝脏加3ml生理盐水[肝脏:生理盐水的比例为1:10(M/V)]制成100g/L匀浆,按试剂盒说明操作,采用硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量。

2.2牛丁力对大鼠急性酒精中毒肝脏损伤的保护

2.2.1牛大力高、中低剂量单次给药组1.

取KM小鼠72只,18～22g,雌雄各半,随机分为6组,分别是空白对照组,模型对照组,阳性对照组,牛大力高(20g·kg-1·d-1)、中(10g·kg-1·d-1)、低剂量(5g·kg-1·d-1)给药组,每组12只。阳性对照组给予联苯双酯,给药剂量为60mg·kg-1·d-1,空白对照组和模型对照组给予等容积蒸馏水,灌胃给药1次/d,连续12d。

2.2.2小鼠血清学指标检测

各组小鼠于末次给药后1h,除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外,均以15ml·kg-1体重56度二锅头酒灌胃,6h后,再次给药,12h后眼眶静脉采血,3000r·min-1离心10min分离血清,测定生化指标;同时处死小鼠,取肝脏、脾脏、胸腺并称其体重;取部分肝组织作相关检测。

2.2.3肝脏指数和胸径指数

血清按试剂盒所述方法测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST);按照肝脏重量/体重(g·100g-1),脾脏重量/体重(mg·g-1),胸腺重量/体重(mg·g-1),分别计算肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数;并切取0.3g肝脏加3ml生理盐水[肝脏∶生理盐水的比例为1∶10m/V]制成100g/L匀浆,按试剂盒说明操作,采用硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量。

2.2.4统计学分析

采用SPSS11.5统计软件进行分析。用单因素方差分析进行统计学显著性分析。组间差异显著性采用单因素方差分析中的LSD方法进