GB 5009.299-2024食品安全国家标准　食品中乳铁蛋白的测定.pdf

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中华人民共和国国家标准

GB5009.299-2024

食品安全国家标准

食品中乳铁蛋白的测定

2024-02-08发布2024-08-08实施

中华人民共和国国家卫生健康委员会唱舍

国家市场监督管理总局GX.I(J

GB5009.299-2024

食晶安全国家标准

食品中乳铁蛋白的测定

1范围

本标准规定了食品中乳铁蛋白的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于巳氏杀菌乳、调制乳、含乳饮料、调制乳粉及乳基婴幼儿配方食品中牛乳铁蛋白含量

的测定．

本标准不适用于风味发酵乳、豆基婴幼儿配方食品中牛乳铁蛋白的测定。

2原理

试样中的牛乳铁蛋白经磷酸盐缓冲液提取，肝素亲和柱富集净化后，反相高效液相色谱柱分离，紫

外检测器于280nm处检测，外标法定量。

3试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1乙脯（CH,CN），色谱纯。

3.1.2三氟乙酸（CF,C02H），色谱纯。

3.1.3氯化纳（NaCl)。

3.1.4磷酸（H,PO,)o

3.1.5磷酸氢二销（Na,HPO,)o

3.2试剂配制

3.2.1磷酸盐缓冲液Iz称取7.1g磷酸氢二销、58.4g氯化销，加900mL水溶解，用磷酸调pH至8.0

±0.2，加水定容至1000mL，临用现配。

3.2.2磷酸盐缓冲液Ez称取28.4g磷酸氢二销，加900mL水溶解，用磷酸调pH至7.5±0.2，加水定

容至1000mL,I临用现配。

3.2.30.1%三氮乙酸溶液z量取1mL三氟乙酸注入900mL水中，用水稀释至1000mL，过0.45µm

滤膜。

3.3标准晶

牛乳铁蛋白标准品（CAS号：146897-68-9）：纯度》95%，铁含量《35mg/100巨，或经国家认证并授

予标准物质证书的标准品。

注E标准品可以使用满足溯源耍求的商品化标准潜液．

3.4标准溶液配制

3.4.1牛乳铁蛋白标准储备溶液（5.0mg/mL）：称取50mg（精确至0.1mg）牛乳铁蛋白标准品用水溶

解，转移至10mL容量瓶并定容至刻度，混匀，0℃～4℃条件下保存，可保存3个月．

3.4.2牛乳铁蛋白标准中间溶液（0.50mg/mL）：吸取LOmL牛乳铁蛋白标准储备溶液，用磷酸盐缓

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冲液I定容至10mL,1脑用现配。

3.4.3牛乳铁蛋白标准系列工作溶液2准确移取上述牛乳铁蛋白标准中间溶液，用磷酸盐缓冲液I稀

释定容，配制成浓度分别为1.0µg/mL、5.0µg/mL、10.0µg/mL、50.0µg/mL、100.0µg/mL和

200.0µg/mL的标准系列工作液，临用现配．

3.5材料

3.5.1肝素亲和柱，1mL，柱容量》2mg，或性能相当者（验证方法见附录B)•

注z使用不同厂商的肝素亲和柱，在样品提取、上样、淋洗和洗脱的操作方面可能会略有不同，应根据肝素亲和柱特

点进行优化。

3.5.2滤膜，水相，0.45µm,

3.5.3水相针头滤器2聚隧矶材质，0.45µm.

4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪E配有紫外检测器或相当者。

4.2天平z感量分别为0.01g和0.1mg,

4.3冷冻离心机，4℃，转速二三10000r/min,

4.4pH计z精度为