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单倍体植株的加倍方法
由于单倍体植株只有配子染色体组成,生活力很弱,难以长期存活,因此,对鉴定的单倍体植株应尽早进行染色体加倍处理。
花药和花粉有自然加倍的可能,但是发生的频率很低,因此,一般需对鉴定出的花药和花粉单倍体植株进行人工加倍。常用的方法是利用0.02%~0.4%的秋水仙素处理花药和花粉单倍体植株,处理方式和部位随植物种类而异。单倍体植株染色体的加倍方法:
1.自然加倍
通过花粉细胞细胞核有丝分裂或核融合染色体可自然加倍,从而获得一定数量的纯合二倍体。
2.人工加倍
人工诱导染色体加倍常用化学诱导方法,有秋水仙素、富民农、对二氯苯、8~羟基喹啉等。秋水仙素是由地中海生长的一种百合科植物秋水仙的种子和球茎提取出来的物质。能溶于水、酒精,可阻止细胞有丝分裂时纺锤丝的形成。
(1)小苗浸泡加倍:双子叶植物烟草用0.4%秋水仙素溶液处理48h,加倍率为35%。
(2)顶芽或腋芽处理加倍:将适宜浓度的秋水仙素水溶液,或调和在载体羊毛脂中,处理植株的顶芽或腋芽,诱导其分生组织的加倍。
(3)培养基加倍:用单倍体植株的营养体置于一种适当的培养基上,诱导形成愈伤组织,然后再放到分化培养基上,再生植株。
3.从愈伤组织再生
将单倍体植株(孢子体)的茎段、叶柄、根茎切下,置适宜的培养基上使之发生愈伤组织转移到分化培养基上,即可获得较多二倍体植株。
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