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ClassinedIndex： Code：10024
Conndential(yes／no)：no NO．100027
DissertationfortheDoctoral
Degree
in Farmsof
Researchons优妇Infection
Pig
and
threeProVinces
Dongbei
Proteomicsofs比如7
ShuJie
Candidate：Wang
Supervisor：Prof．ZhangXiuYing
ofAgriculture
DegreeCategory：Doctor
College：BasicsVeterina拶Medicine
leVel Medicine
First discipline：Veterinaly
SecondleVel
HarbinChina
June2013
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目 录
东．1E伙、fl，』、。’≯农’≯卜’≯f■i金乏
3．2MLST分析结果…………………………………………………………………………27
3．3GDH蛋白的原核表达…………………………………………………………………………28
3．3．1GDH基冈的PCR扩增与克隆………………………………………………………28
3．3．2GDH蛋白的原核表达和SDS—PAGE鉴定…………………………………………．．29
3．3．3表达蛋白的Westen．blot鉴定……………………………………………………………………30
3．4间接ELISA方法的建立结果……………………………………………………………30
3．4．1间接ELISA相关条件确定试验结果………………………………………………．3l
3．4．3交叉反廊试验………………………………………………………………………31
3．4．4批内重复性试验…………………………………………………………………………3l
3．4．5批间重复性试验………………………………………………………………………………3l
3．4．6敏感性试验……………………………．^．．…………………………………………32
3．4．7猪链球菌抗体检测结果……………………………………………………………．32
3．5比较蛋白组学的研究……………………………………………………………………32
3．5．1两株猪链球凶7型分离株的致病力实验…………………………………………．．33
3．5．2双向电泳结果……………………………………………………………………………………一33
3．5．3质谱鉴定结果……………………………………………………………………………………．．34
3．5．4实时荧光定量RT—PCR测定及数据分析…………………………………………．36
3．5．510蛋白基冈的mRNA表达鹫的比较结果…………………………………………．．37
4讨论………………………………………………………………………………………………………………………．40
4．1猪链球菌在东北三省猪场的感染状况…………………………………………………40
4．2猪链球菌7型分离株的致病性试验……………………
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