福氏志贺菌主动外排基因acrB的克隆与序列分析.pdfVIP

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2017-09-12 发布于湖北
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福氏志贺菌主动外排基因acrB的克隆与序列分析.pdf

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2008年 l2月甘肃农业大学学报第 43卷第 6期 6～8 J0URNAL OF GANSU AGRICULTURALUNIVERSITY 双月刊福氏志贺菌主动外排基因acrB的克隆与序列分析王松泰。，张继瑜，魏小娟。，付元芳，曹小安。，邱昌庆。 (1_甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州 730070；2．中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，新兽药重点实验室．甘肃兰州 730050；3．中国农业科学院兰州兽医研究所。家畜疫病病原生物学国家重点实验室，甘肃兰州 730046) 摘要：以福氏志贺菌 2a型菌株基因组为模板，经 PCR扩增得 acrB基因，将该基因克隆到 pMD18一TVector载体，将重组质粒进行PCR和酶切鉴定及序列测定．结果表明：测定序列与Genbank收录的福氏志贺菌参考序列同源性为99．7％，与大肠杆菌的acrB基因序列比较分析，序列同源性在 98％～99 之间，说明志贺菌主动外排基因acrB在碱基序列和编码的氨基酸序列上均与大肠杆菌有很高的同源性，它可能是志贺菌引起多重耐药的主要原因．关键词：志贺菌；acrB基因；克隆；序列分析中图分类号：S852．612；Q786 文献标识码：A 文章编号：1003—4315(2008)06—0006—03 Cloningandsequenceanalysisofactiviteeffluxgene acrBofShigellaflexneri2a WANGSong—tai～．ZHANGji—yu。，WEIXiao—juan。，FU Yuan—fang ，CAOXiao—an。，QIU Chang—qing。 (1．CollegeofVeterinaryMedicine，GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China,2．LanzhouInstituteofAnimal Science＆ VeterinaryPharmaceuticsSciences，ChineseAcademyofAgriculturalSciences．1anzhou730050，China 3．LanzhouVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Lanzhou730046，China) Abstract：ToidentifythesequenceoftheactiveeffluxgeneacrBinShigellaflexneri2aandanalyze itssequence，thewholeacrBgeneW3SamplifiedbyPCRfrom Shigellaflexneri2agenomeDNA．TheacrB genewasligatedwithpMD18一TvectorandtransformedintocompetentcellDH5．Identificationofrecombi— nantvectorwasconductedbyPCR andrestriction enzymedigestion．Sequenceanalysisindicatedthatthe sequenceofacrBgeneofShigellafzexneri2ashared99．8 homologywiththereferencesequenceof Shigellaflexneri(GenebankNo．NC_oo4337)andshared9896／～99o,4homologyweredetectedincompar— isonwithE．coli．TheactiveeffluxgeneacrBofShigellaflexneri2ashowedhighhomologyinbases，enco— dingaminoacidswithE．colianditwaspossiblethatShigellaflexneriwasresistanttomultipleantibiot— iCS． Keywords：Shigell