进出口饮料中维生素C的测定方法编制说明.docVIP

《进出口饮料中维生素C的测定方法》编制说明 1、 任务来源 根据国家标准化管理委员会下达的2012年检验检疫行业标准制订计划项目的通知，本单位承担了《进出口饮料中维生素C的测定方法》，计划编号为2012B265r。 2、研究背景 维生素C（英文名：Vitamin C），又称抗坏血酸（Ascorbic acid）。化学名：L-3-氧代苏己糖醛酸内酯（L-3-Ketothreohexuronic and lactone）。这种左式右旋光的L(+)抗坏血酸（L(+)ascorbic acid，结构式见图1）具有强还原性，是一种天然存在的具有抗氧化性质的有机化合物。亦是一种维持人体正常活动不可缺少的营养物质。异抗坏血酸（又称D-抗坏血酸）是L-抗坏血酸同分异构体（结构式见图2），同样具有强还原性，但对生物以及人体几乎没有生物活性。 L-抗坏血酸极不稳定，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是在有氧化酶及痕量铜、铁等重金属离子存在时，易被氧化成为左式脱氢抗坏血酸（Dehydro-L(+)ascorbic acid，结构式见图3），脱氢抗坏血酸又易还原成抗坏血酸，两种天然形式都可被人体利用，体内也能有效地利用两种合成的L-抗坏血酸。 抗坏血酸参与体内脂肪和糖的代谢，使血中胆固醇减少，增加心脏冠状动脉血流量，改善心肌氧和能量的供应；可以增强机体抵御疾病的能力，促进毛细血管致密性增加，减少渗透压及血管的脆性，刺激造血机能和微量元素的吸收；对各种毒物有解毒作用，可以促进肝细胞的再生、肝糖元的合成和加强肝脏的解毒功能，对治疗肝炎有辅助作用。身体里长期缺少维生素C，容易发生坏血病，严重时甚至造成死亡。L-抗坏血酸广泛分布在植物组织中新鲜水果及蔬菜中含量尤多，多数哺乳类和禽类也都能由葡萄糖合成足够数量的 L-抗坏血酸，但人却不能生物合成维生素C，因此必须经常从环境或饮食中摄取补充维生素C。随着人民生活水平的提高，除了品种繁多的蔬菜和水果，越来越多的富含维生素C的保健品逐渐被人们接受和喜爱。因此，建立并完善食品中维生素C的准确、快速的检测方法具有重要意义。 图1 L(+)抗坏血酸结构式 图2 异抗坏血酸结构式 图3 脱氢抗坏血酸结构式 目前国内测定抗坏血酸的标准方法主要有荧光法、比色法和滴定法不同的方法检测的对象也有所不同。GB 5413.18-2010食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素C的测定、GB/T 5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2，4-二硝基苯肼法)和GB/T 9695.29-2008肉制品 维生素C含量测定中均采用荧光法测定食品中总抗坏血酸含量，该方法专一性和选择性较好，但操作繁琐且荧光读数不稳定。GB/T 5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2，4-二硝基苯肼法)中第二法采用的是2,4二硝基苯肼比色法比色法易受杂质和颜色干扰，误差较大，且试验过程复杂，不易操作（使用腐蚀性试剂硫酸和易爆试剂2，4-二硝基苯肼）。此外，国内现有标准中国药典的碘量法和GB/T 6195-1986水果、蔬菜维生素C含量测定法中的2,6二氯酚靛酚滴定法和GB/T 5009.159-2003食品中还原型抗坏血酸的测定中的固蓝盐B比色法都是测定维生素C片和食品中还原型抗坏血酸的方法。此类方法易受深色样品的颜色干扰，灵敏度低，误差较大。在现有的国家标准还没有高效液相色谱法测定食品中抗坏血酸。各种方法的比较见表1。 国际上测定抗坏血酸的标准方法主要有液相色谱法、荧光法、比色法和滴定法。欧盟标准EN 14130-2003采用的是高效液相色谱法，可分别测定还原型（L型、D型）抗坏血酸和总抗坏血酸含量，方法操作简便、快速，灵敏度高。ISO 6557-1-1986标准和AOAC967.22、AOAC984.26公定方法所采用的都是较为普遍的荧光法。AOAC 985.33采用的似2,6二氯酚靛酚滴定法测定还原性抗坏血酸的含量。综上所述，液相色谱法相对于其他方法来讲，更为简单、快速、准确。而且现在液相色谱技术作为一种具有高灵敏度，高选择性的高效快速分离分析技术，使用越来越普遍。 表1 抗坏血酸的不同测定方法比较 方法名称 碘量法 2,6–二氯靛酚滴定法 2,4二硝基苯肼法 荧光法 液相色谱法 操作性 直观 简便，快速 前处理繁琐 前处理繁琐 简便，快速， 测定对象 L-维生素C L-维生素C 总维生素C 总维生素C L-维生素C和总维生素C 适用范围 纯度测试 水果，蔬菜 蔬菜，水果及其制品 婴幼儿食品和乳品；水果，蔬菜及其制品 水果，蔬菜及其制品；饮料，谷物、乳粉，维生素C含片 局限性 易受其他还原性物质干扰；