注射表达hBMP7的髓核细胞延缓同种异体椎间盘移植后的退变的实验研究.pdfVIP

书面交流 结果DR片检测结果显示除C组有1例犬的移植椎间盘出现了跨椎问盘的骨性融合外，其余 17例移植椎间盘均与上下椎体愈合，且未见明显的骨刺形成，对植入椎间盘的高度的动态监测显示 三组椎间盘高度改变未见差别(P0．05)；MRI检测结果显示：术后1m三组MRIT2像灰度比未见差 别，而在3m和6m时，移植椎间盘MRI 而对屈伸及侧弯活动度检测发现三组间未见统计学差别；PKH一26荧光检测显示在A和B组复合髓 核细胞的同种异体椎间盘在移植后的6m时，仍可在荧光显微镜下观察到红色荧光的散在表达，证 明移植后6m时仍有外源性髓核细胞存活；对三组椎间盘的HE形态学检测结果发现三组移植间盘结 构均有退变性改变，而A组及B组退变性改变明显较C组轻；髓核的胶原染色显示A组髓核组织胶 原含量较B组及C组明显增多，B组较C组胶原纤维轻度增多；PCR检测结果显示：6m时A组仍 可检测到hBMPmRNA的高表达。 结论通过将hBMP7基因修饰的髓核细胞同同种异体椎间盘复合后在行异体移植的方法能明显 延缓单纯的同种异体椎间盘移植后的退变性问题。但需要大规模的动物实验进行相关结果的进一步 验证。 关键词人骨形态发生蛋白一7髓核细胞体外构建椎间盘移植基因转染 应用自体血清与胎牛血清培养兔关节软骨细胞生物学特性改变的比较 傅欣段小宁张继英于长隆 北京大学第三医院运动医学研究所 目的 比较10％兔自体血清与10％胎牛血清培养兔关节软骨细胞的生物学特性的不同。 方法兔自体血清培养液的制备后，分离培养兔关节软骨细胞，分别在10％自体血清和10％胎 牛血清中进行单层传代培养至1代，3代和5代，采用光镜观察细胞形态变化、绘制生长曲线评估 细胞增殖速度、通过甲苯胺兰染色，I、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色以及流式细胞分析细胞I、Ⅱ 型胶原和CD26及CD44的表达检测软骨细胞生物学行为的变化。 结果①自体血清和胎牛血清培养的软骨细胞在1代均呈多角形，而在第3代则向梭形转变。 在细胞形态上自体血清和胎牛血清培养的软骨细胞差异不大。②自体血清培养的软骨细胞较胎牛血 清培养的软骨细胞生长速度更快。③甲苯胺蓝染色结果显示：无论是自体血清还是胎牛血清所培养 的细胞，染色随代龄的增加逐渐变浅，细胞传至第5代时两组几乎均无异染。对于1代和3代细胞 而言，自体血清培养的软骨细胞较胎牛血清所培养的软骨细胞较为深染。④免疫组化染色和流式结 果表明，I型胶原的表达随代数的增加而增加，而Ⅱ型胶原的表达则随代数的增加而减少。自体血 清培养的软骨细胞I型胶原的表达在3代时比胎牛血清培养的软骨细胞I型胶原的表达低，有显著 性差异(P0．05)。自体血清培养的软骨细胞Ⅱ型胶原的表达在1代和3代时比胎牛血清培养的软骨 细胞Ⅱ型胶原的表达高，有显著性差异(尸0．05)。⑤流式细胞仪观察显示，CD26表达呈现先升高 后降低的趋势。而CD44的表达不随传代数的增加而改变。 结论 同异体10％胎牛血清相比，10％自体血清培养的兔软骨细胞生长速度快，且在大部分指 标上看可以较好保持细胞表型。 关键词兔自体血清关节软骨细胞反分化 ·497· 注射表达hBMP7的髓核细胞延缓同种异体椎间盘移植后的退变 的实验研究 作者： 王超锋， 张超， 王德利， 吴建宏， 何勃， 阮狄克 作者单位： 海军总医院骨科 引用本文格式：王超锋.张超.王德利.吴建宏.何勃.阮狄克 注射表达hBMP7的髓核细胞延缓同种异体椎间盘移植后 的退变的实验研究[会议论文] 2012