阿托伐他汀对兔动脉粥样硬化心脏胶原表达影响.docxVIP

山西医辩大学硬士学位论文前言动脉粥样硬化的发生是多种机制综合作用的结果，其发病机制和抗动脉粥样硬化药物越来越成为研究的熟点，在冠状动脉粥样硬化时除血管损伤外，心脏本身的改变成为近年研究的热点，其中心脏基质特别是心脏胶原在冠状动脉粥样硬化时的改变成为目前国内外的研究视点。他汀类药物调脂作用强，具有抗炎抗氧化等不依赖于降血脂作用的心血管保护作用，我们通过建立动脉粥样硬化动物模型，从对心脏局部ＡｎｇＩＩ和心脏胶原的变化观察阿托伐他汀对动脉粥样硬化的一级预防作用。心脏功能不仅取决于心肌本身的舒缩，还与心脏间质密切相关，随着分子生物技术的不断进步，已有实验证明，心脏间质中的胶原是心脏结构不可忽视的组成部分，心脏间质中的胶原主要是以胶原纤维形式存在，相互交织，构成一个多层次、多方位、复杂的三维空间结构，而胶原纤维主要由心脏间质的成纤维细胞产生和分泌的Ｉ型和Ⅲ型胶原组成，Ｉ型胶原占总数的８０％８５％，ＩＩＩ型胶原约占１１％。前者聚合成粗纤维，后者聚合成细纤维，编织成纤维网络，维持心肌的结构和功能完整。心脏间质胶原过多或不足，都可导致心脏的构型改变，从而引起心脏功能障碍【Ｉ】。研究证明在冠状动脉粥样硬化时心脏局部肾素一血管紧张素系统（ｒ∞ｉｎ—粕ｇｉｏｔｅ璐ｉｎｓｙｓｔｅｍ，ＲＡＳ）处于激活状态，大量文献报道ＲＡＳ广泛存在于局部组织如血管内皮、平滑肌、心肌、肺、肾、脑和性腺等，以自分泌或旁分泌形式发挥作用并通过血液循环作用于其他器官，病理情况下，组织中ＲＡＳ活性增加与高血压、动脉粥样硬化、心肌肥厚、血管中层硬化、细胞凋亡和心力衰竭等密切相关，ＨＯＰＥ实验证实正常血压的冠心病高危患者应用ＡＣＥＩ后发病率和死亡率明显降低，说明ＲＡＳ与冠状动脉粥样硬化发生和发展之间有潜在关系【２】。ＡｎｇＩＩ是ＲＡＳ的关键物质，其在动脉粥样硬化发生发展中的作用已被广泛的研究。ＡｎｇＩＩ可以收缩冠状动脉、诱发冠脉痉挛、加重动脉炎症ｐ】损伤血管内皮细胞功能促进冠状动脉内皮细胞凋亡１４】［５１抑制纤溶促进凝血有利于血栓形成１６］１７１嘲促进血管平滑腮细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ，ＶＳＭＣ）的增殖和迁徙并抑制其凋亡唧【ｌ川氧化修饰低密度脂蛋白ＩＤＬ促进巨噬细胞和ＶＳＭＣ摄取脂质转变成泡沫细膨１１１㈣由此可见ＡｎｇＩＩ参与了动脉粥样硬化尤其是冠状动脉粥样硬化发生发展的多个环节。文献报道在心肌梗死时ＡｎｇＩＩ参与了胶原的增生和堆积，在冠状动脉粥样硬化时心脏胶原的基因表达、含量、比例等也会发生改变，实验证实在冠状动脉粥样硬化时Ａｎ９１１参与了心脏胶原的改变（增生，堆积、改建、比例失调）。他汀类药物通过调节血脂、稳定动脉粥样硬化斑块、减轻局部炎症反应、抑制血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌｓ，ＶＳＭＣ）增殖和抗氧化作用来防治动脉粥样硬化，他汀类药物在动脉粥样硬化的一级预防过程中，对心脏局部肾素一血管紧张素系统尤其是心脏局部ＡｎｇＩＩ含量以及对心脏胶原影响的系统研究在国内外尚不多见，本实验就此做一具体研究。山西医辩大学磺士学位论文材料和方法１．，材料１．１．１实验试剂及药物羟脯氨酸试剂盒血管紧张素ＩＩ放射免疫分析药盒总ＲＮＡ提取试剂盒Ｔｒｉｚｏｌ，反转录酶Ｍ．ＭＬＶ（ＲＮａｓｅＨ一）ＴａｑＤＮＡ聚合酶，ｄＮＴＰ引物合成南京建成生物工程研究所中国人民解放军海军总医院ＴａＫａＲａ宝生物工程（大连）有限公司上海杰美基因医药科技有限公司北京奥科生物技术有限责公司Ｉ兔子的ＧＡＰＤＨ（磷酸甘油醛脱氢酶）：Ｓｅｎｓｅｆ５’．ＴＧｌ３１℃ＡＣＣＡＧＧＧＣＴＧ‘１ＴｒｒＡＡＣｒ－３’Ａｎｔｉ—Ｓｅｎｓｅ：５’．ＧＣＴＡＡＧＣＡＧｌ’ｒ‘ＧＧＴＧＧＴＧＣＡＧＧＡ．３＋②兔子的Ｉ型胶原：③兔子的ⅡＩ型胶原：氯仿、异丙醇、乙醇阿托伐他汀钙片（立普妥）胆固醇１．１．２实验仪器显微摄影系统手术器械、器皿等低速台式离心机低速台式离心机恒温烤箱Ａ１６０４Ｓ电子分析天平紫外分光光度仪Ｓｅｎｓｅ：５＇－ＣＧＧＴＧＧＴｒＡＣＧＡＣＴＴＴＧＧ一３。Ａｎｔｉ－Ｓｅｎｓｅ：５：Ｃ１１℃ＡＧＧＡＧＴＧＡＧＧＡＧＧＧＴ．．３Ｓｅｎｓｅ：５ＬＡＴＡＡＡｃｃ从ｃｃＴＩ肌ａ盼．３’Ａｎｔｉ－Ｓｅｎｓｅ：５。一ＧＣＡＣＣＡＴｒＧＡＧＡＣＡＴｒｒＩ．Ｇ．３’北京北化精细化学品有限公司辉瑞制药有限公司山西普兴生化工程有限公司日本０ＬＹＭＰＵＳ公司上海医疗器械有限公司北京医用离心机厂北京医用离心机厂上海医疗器械有限公司上海电子天平厂日本日立公司ＰＴＣ．１００ＰＣＲ扩增仪东胜创新生物科技有限公司ＳＯＲＶＡＬＬｆｒｅｓｃｏ低温高速离心机ＴＬ－４２０Ｂ型数显恒温水浴箱电泳仪德国索福／贺利公司深圳市穗津泰科技有限公司北京市六一仪器厂山西医辩大学硬士学位论文ＴａｎｏｎＧｉｓ２０１０图象分析四川川