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关于睾丸灌注超低温冷冻对家兔移植睾丸功能的影响 【摘要】研究睾丸灌注超低温冷冻对家兔睾丸功能的影响，探讨移植睾丸的保 存方法。方法 通过自体或异体移植，比较低浓度冷冻保护剂活体灌注或体外灌 注、高浓度冷冻保护剂活体灌注或体外灌注对兔睾丸冷冻后的完整率、移植成 功率、睾酮分泌及精子生成的影响。结果 高浓度冷冻保护剂活体灌注效果最好， 冷冻后睾丸完整率为29.3%，血流再通率为79.2%，睾酮分泌接近正常水平，精 子生成持续时间可达2 个月。结论 采用高浓度冷冻保护剂行活体灌注的方法可 有效地保护部分睾丸结构及功能，移植后可产生接近正常水平的睾酮和保持较 长时间的生精。 【关键词】睾丸 移植 超低温冷冻 精子生成 睾酮 兔 Abstract: Objective To study the effect of cryopreservation on the function of transplanted rabbit testicle. Methods The testes were perfused in vivo or in vitro with high-concentration or low- concentration cryoprotectant， and then， cryopreserved. The testis integrity was judged after thawing， the transplant success was decided on the operating table. The testosterone secretion and spermatogenesis were compared later. Results The best results were obtained in the group perfused in vivo with high-concentration cryoprotectant. In this group， the testis integrity rate was 29.3%， the rate of blood vessel recanalization was 79.2%， the secretion of testosterone was close to normal level， and the spermatogenesis continued longer than 2 months. Conclusion By using high- concentration cryoprotectant and in vivo perfusion ， it is likely to effectively protect the structure and function of the graft testis. After transplantation， the testis could secrete testosterone close to normal level and maintain a long-time spermatogenesis. Key words: testicle; transplantation; cryopreservation; spermatogenesis; testosterone; rabbit 随着器官移植工作的广泛开展，使器官的需求大大增加，仅新鲜器官移植 已不能满足日渐增长的临床需要，器官的冷冻保存可使临床器官移植更为方便、 快捷，是临床器官移植的有效保障。在既往器官冷冻保存移植工作的基础上 ［1～3］，我们进行了家兔睾丸的超低温冷冻保存及移植试验。 1 材料和方法 1.1 实验动物及手术方法 10～18 月龄性成熟日本大耳白兔（徐州医学院 实验动物中心），体重3.5～4.0 kg，按常规方法饲养管理，精子及睾酮检测 无异常。 实验动物随机分为低浓度体外、高浓度体外、低浓度活体和高浓度活体4 组进行睾丸灌注。睾丸灌注后连同输精管和睾丸动静脉一起采摘后进行冷冻。 受体家兔皮下注射速眠新 （0.2 ml/kg）麻醉，睾丸动静脉采用11-0 尼龙线在 手术显微镜下行端端吻合，输精管在手术显微镜下用9-0 尼龙线行端端吻合。 开放动脉后血流运行达睾丸静脉，则定为血流再通；血流运行通过静脉吻合口 并且血运持续10 min 以上则定为睾丸移植成功。 1.2 冷冻保护剂的配制 高浓度冷冻保护剂中含有2.5 mol/L 甘油和2.5