胞浆型磷脂酶a,2αcpla,2α在小鼠早期妊娠子宫中的表达与调节-expression and regulation of cytoplasmic phospholipase a, 2alpha cpla, 2alpha in mouse uterus during early pregnancy.docx

摘要胞浆型磷脂酶A2a(cPLA2Ⅱ)是一种分子量为85kDa的酶类．为磷脂酶A2(PLA2)超家族的主要成员之一．组成性地表达于多种细胞和组织中，其活化受到Ca2+浓度和磷酸化的调控。cPLA2Ⅱ催化细胞膜甘油磷脂的sn-2位脂肪酸水解并释放花生四烯酸，主要负责向环氧合酶系统提供AA，是前列腺索的生物合成的前体。通过该途径产生的PGs在各种雌性生殖功能中起着重要的作用。本实验以小鼠为材料，利用原位杂交和免疫组化方法，检测cPLA2n基因在小鼠早期妊娠子宫中的表达，并利用假孕、延迟着床、人工蜕膜化及激素处理等模型研究cPLA2a基因在子宫中的表达与调节。在妊娠第l～5天的子宫腔上皮和腺上皮中，可以检测到cPLA2a蛋白的表达。在第20天的子宫腔上皮和腺上皮中可以检测到cPLA2ⅡmRNA的表达。cPLA2a在妊娠第3天有较强的表达。在妊娠第6天系膜侧的初级蜕膜区，以及第卜8天的系膜侧的次级蜕膜区，可以检测到cPLA2a蛋白和mRNA的表达。在人工诱导蜕膜化的子宫中，cPLA2a蛋白和rnRNA主要在系膜储的次级蜕膜区表达。在假孕小鼠的子宫中，在第l、4、5、8天的子宫腔上皮和腺上皮中可I；i检测到cPLA2a蛋白的表达，但只在第4、5、8天的子宫腔上皮和腺上皮中可以检测到cPLA2ⅡrnRNA的表达。在延迟着床的小鼠子宫中，cPLA2Ⅱ蛋白和mRNA较强地表达于子宫腔上皮和腺上皮中。在延迟着床激活的子宫中，几乎检测不到cPLA2amRNA的表达，但可以检测到减弱的cPLA2a蛋白。这些结果表明．在围着床期的子宫中cPLA2a基因表达受到下调。在切除卵巢的小鼠子宫中，cPLA2amRNA和蛋白在于富腔上皮和腺上皮中表达。用雌激素或孕酮处理小鼠后。cPLA2a蛋白表达变化不明显，但雌激素处理组中，cPLA2amRNA在子宫腔上皮和腺上皮的表达发生下调，在其他处理组中cPLA2amRNA信号没有明显的变化。总之，cPLA2a可能在小鼠的胚胎着床和蜕膜化过程中起重要作用。关键词cPLA20t；小鼠；子宫；胚胎着床；蜕膜化ExpressionandRegulationofCytosolicPhospholipaseA2aGeneinMouseUterusduringEarlyPregnancyAbstractCytosolicphospholipaseA2a(ePLA2呻，oneofthephospholipaseA2superfamily(PLA2)members．isubiquitouslyandCOnSfitutiveiyexpressedinmostcellsandtissues．n∞activationofcPLA2ⅡisregulatedbyCa圹concentrationandphosphorylation，cPLA2ucatalyzesthehydrolysisofthesn-2positionofmembraneglycarophos-pholipidstoliberatearachidonicacid(AA)andisamajorproviderofarachidonicacidforthecyclooxygenase(cox)systemforthebiosynthesisofpmstaglandins(PGs)．PGssynthesizedbythispathwayareimplicatedinvariousfemalereproductivefunctions．whichisundertheregulationofcPLA2a．TheaimofthisstudywastoexaminecPLA2agoneexpressionandregulationinmouseuterusduringearlypregnancy,pseudopregnancy,delayedimplantation,artificialdecidualizationandhormonaItreatmentbyinsituhybndizationandimmunohistochemistry．cPLA，旺immunostainingwasdetectedintheiuminalepitheliumandglandularepitheliumofmouseuterusfromdaysl々O5ofpregnancy．cPLA2arnILNAsignalcouldonlybedetectedfromdays2to4ofpregnancy，AstronglcvelofcPLAzaexpressionwasobservedintheepitheliumonday3ofpregnancy．cPLAzumRNAandimmunostainingwerelo