不同浓度ALLN对C2C12成肌细胞增殖和凋亡的影响-外科学(普外)专业论文.docxVIP

目录 HYPERLINK \l _bookmark0 英汉缩略词对照表 1 HYPERLINK \l _bookmark1 中文摘要 2 HYPERLINK \l _bookmark2 Abstract 4 HYPERLINK \l _bookmark3 前言 6 HYPERLINK \l _bookmark4 实验原理 7 HYPERLINK \l _bookmark5 实验材料及仪器 9 HYPERLINK \l _bookmark6 实验方法 11 HYPERLINK \l _bookmark7 统计学处理 18 HYPERLINK \l _bookmark8 实验结果 18 HYPERLINK \l _bookmark9 讨论 25 HYPERLINK \l _bookmark10 结论 28 HYPERLINK \l _bookmark11 参考文献 30 HYPERLINK \l _bookmark12 综述 33 HYPERLINK \l _bookmark13 参考文献 39 HYPERLINK \l _bookmark14 基金资助 41 HYPERLINK \l _bookmark15 攻读硕士学位期间完成的论文 42 HYPERLINK \l _bookmark16 致 谢 43 福建医科大学硕士学位论文 福建医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 英汉缩略词对照表 Abbreviations and Acronyms 英文缩写 英文全称 中文名称 ddH2O DMEM/F12 Double distilled water Dulbecco minimum essential medium 双蒸水 达尔伯克基础培养基 DMSO Dimethyl sulphoxide 二甲基亚砜 FBS Fatal bovine serun 胎牛血清 h Hour 小时 min Minute 分 OD Optical density 光密度 PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 UPP Ubiquitin proteasome pathway 泛素-蛋白酶体系统 ALLN N-acetyl-leu-leu-norleucinal N-乙基-顺丁烯二酰亚胺 CAST Calpastatin 钙蛋白酶抑制蛋白 MTT Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide 噻唑蓝 CC Cancer cachexia 癌性恶病质 PIF Proteolysis-inducing factor 蛋白水解因子 AIF Apoptosis-inducing factor 凋亡诱导因子 CaCl2 Calcium chloride 无水氯化钙 不同浓度 ALLN 对 C2C12 成肌细胞增殖 和凋亡的影响 中文摘要 目的：观察不同浓度钙蛋白酶抑制剂 ALLN 对体外 Ca2+处理的 C2C12 成 肌细胞增殖和凋亡的影响。 方法：本研究中我们采用不同浓度 Ca2+干预后 MTT 法酶标仪检测 0、6、 12、24、36、48、72 h 的吸光度（Optical density，OD）值；一定浓度 Ca2+和 不同浓度 ALLN 干预后 MTT 法酶标仪检测 0、6、12、24、36、48、72 h 的 OD 值；一定浓度 Ca2+和不同浓度 ALLN 干预后 Annexin V-FITC/PI 双染法流 式细胞仪分析 36 h 的凋亡率；一定浓度 Ca2+和不同浓度 ALLN 干预后 Giemsa 染色法显微镜观察 36 h 的细胞形态，来研究不同浓度作用下不同时间点骨骼 肌成纤维细胞增殖和凋亡情况并观测其凋亡形态。 结果：不同浓度的 Ca2+的干预 C2C12 细胞：MTT 实验结果表明 C2C12 细胞在无血清培养基培养下，6～72 h 细胞开始迅速增殖，36 h 的 OD 值与 0～ 24 h 相比差异有统计学意义（P＜0.01）细胞处于对数生长期且未出现分化； 不同时间点 Ca2+ 128 mmol/L 组细胞的 OD 值均为最低，其次为 Ca2+ 16 mmol/L 组、Ca2+ 32～64 mmol/L 和 Ca2+ 0.5～8 mmol/L，Ca2+组与对照组相比 OD 值 明显降低（P＜0.05）；16 mmol/L 的 Ca2+可以抑制 C2C12 细胞增殖并诱导其凋 亡； 16 mmol/L的Ca2+和不同浓度的ALLN干预C2C12细胞6、12、24、36 h后 ALLN1～7组（含终浓度为16 mmol/L的Ca2+和ALLN终浓度为3.125、6.25、12.5、 25、50、100、200