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微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌研究现状及应用 　　苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，简称Bt。苏云金杆菌的发现，为人们利用微生物消灭植物病虫害提供了美好的前景。化学杀虫剂的长期使用对生态环境产生了严重的破坏，而害虫种群的抗药性也日益提高，因此生物杀虫剂因为其“绿色环保”的特点日益引起人们的广泛关注。现在，人们已经用发酵罐大规模地生产苏云金杆菌并制成粉剂或可湿剂、液剂，应用于农业，对100多种害虫有不同的致病和毒杀作用。苏云金芽孢杆菌是目前世界上产量最大、应用最广的生物杀虫剂。本文简要介绍作为生物杀虫剂的Bt的发展历史、研究现状和应用情况。 　　研究历史[1] 　　1901年，日本学者石渡繁胤（Ishiwata Shigetane）从虫尸体液中分离出苏云金杆菌猝倒变种（Bacillus.thuringiensis var.sott）成为苏云金杆菌研究的起点[2]。1911年，Berliner发现一杆菌，并详细描述了该菌的形态和培养特征，定名为苏云金杆菌（Bacil-lus.thuringiensis），指明苏云金杆菌含伴孢晶体（Paraspora crystl）[3]。1938年，苏云金杆菌商品化，用于防治地中海粉螟。20世纪50年代许多国家进行了商业性生产。1953年，Hannay第一次发现苏云金杆菌的杀虫活性与伴孢晶体有关，并和Fitz-James于1955年证实，伴孢晶体是一种蛋白质。1981年，Schnept和Whiteley首次将HD21菌株伴孢晶体的基因克隆到大肠杆菌中，并得到表达。20世纪60年代用血清学技术进行Bt的鉴定和分类。自二次世界大战后，苏云金芽孢杆菌被广泛使用，至今已有60多年[4]。由于其推广力度以及人们的农药使用意识的传统观念限制，目前生物农药仅占全部农药市场份额很少一部分，从此可看出，苏云金芽孢杆菌杀虫剂任然具有较大的发展潜力。 　　简介 　　Bt是一种革兰氏阳性芽孢杆菌，为昆虫病原细菌，其菌体为短杆状、有鞭毛，一般单生或形成短链。它是一个多样性丰富的种群，按照其鞭毛抗原的差异，可将现有分离得到的Bt分成71 个血清型，共83 个亚种。已确定数十种苏云金芽孢杆菌菌系及130多种它们编码的杀虫晶体蛋白，近几年克隆Bt基因已转入植物，并在植物体内高效表达。 　　Bt的综合利用苏云金芽胞杆菌作为一种生物农药，广泛应用于消杀害虫。其机理是Bt菌体能在芽孢形成期可产生具有杀虫活性的晶体蛋白，且伴孢晶体（原毒素）对鳞翅目或双翅目等多种昆虫具有毒杀活性[5]。昆虫取食后，晶体蛋白的杀虫作用过程要经过溶解、酶解活化、与受体结合、插入以及孔洞或离子通道的形成等五个环节。扰乱中肠内正常的跨膜电势及酸碱平衡，导致上皮细胞退化，内脏机能麻痹，进食停止，最终害虫因饥饿和（或）败血而死亡。 　　研究现状及成果 　　苏云金芽胞杆菌也是一种重要的生物杀蚊制剂，目前已发现多种亚种或血清型具有灭蚊活性，如Canadensisi亚种、Morrisoni亚种、Darmstadiensis亚种、Thompsoni亚种和Jegathesan亚种等[6-7]。科学家们已经在微生物、生物工程、基因工程等多个领域里有了多方面的研究进展，通过大量的文献分析表明，苏云金芽孢杆菌（Bt）的研究主要集中在分子水平上[8]。随着生物技术的发展，现在已对苏云金芽孢杆菌的杀虫蛋白质和相关基因作了深入而透彻的研究，也就是说在基因的水平上对它有了更多的了解。研究发现，在其体内具有一种Cry基因，正是这种基因编码产生的蛋白质对上述昆虫具有极大的毒性，所以这种基因的结构和特性就影响到它本身，也影响到它的杀虫范围。当然某一基因的长期应用会刺激昆虫产生抗体。因此，现在对苏云金芽孢杆菌的研究更多地集中在分子水平上。 　　我国Bt生物农药的研究开发与应用技术已达到国际先进水平。新型发酵设备的出现、发酵吨位的提高、工业发酵技术的成熟、发酵液处理技术的完善以及剂型的多样化都无疑为我国Bt生物农药产业发展创造了条件。我国的主要研究成果体现在：研制和生产质优价廉的Bt悬浮剂和高效价的粉剂，实现了中国Bt杀虫剂的商品化生产；建立了以生物测定为基础的产品毒力效价测定的质量标准化技术化系统；研究了助剂及贮存条件对Bt的影响，为助剂的筛选和有效存贮提供了可靠的依据；大规模推广应用Bt杀虫剂以防治棉、粮、果蔬及林业害虫，并取得了良好的效果；Bt粉剂的毒力效价和防虫效果，已达到国际同类产品先进水平；以棉铃虫和小菜蛾为标准昆虫，建立了中国Bt产品质量标准化测定技术系统，为国产Bt杀虫剂的行业标准的建立奠定了良好基础，为与Bt杀虫剂国际质量标准接轨提供了保障。 　　优势及存在问题 　　Bt杀虫剂的优势 　　Bt细菌的蛋白质毒素在人和家畜、家禽的胃肠中不起作用，因此对人畜无毒，使用安