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钙胁迫对金银花生理生化特性影响 　　摘要：以金银花幼苗为试验材料，研究不同浓度（0、5、20、30、40、50 mmol/L）的外源钙（Ca2+）对金银花生理生化特性的影响。结果表明，经过60 d钙胁迫，0、30、40、50 mmol/L Ca2+下金银花的可溶性蛋白、游离脯氨酸含量相对CK（5 mmol/L Ca2+）显著增加；可溶性淀粉、可溶性糖含量变化不明显，可溶性淀粉含量仅缺钙情况下显著增加，可溶性糖含量只有（相对CK）0 mmol/L Ca2+显著增加，50 mmol/L Ca2+显著减少。随着钙离子浓度的增大，MDA含量、POD和SOD活性表现为先减少后增加的趋势，根系活力变化则相反，CAT活性显示逐渐增加趋势。0、40、50 mmol/L Ca2+处理POD、SOD活性显著增加，40、50 mmol/L Ca2+浓度与CK相比CAT活性显著增加。在20 mmol/L Ca2+浓度下，金银花MDA含量最小、根系活力最高，且能在30 mmol/L Ca2+浓度下良好生长。研究认为，金银花可通过增加渗透调节物质（可溶性蛋白、游离脯氨酸）的含量及抗氧化酶间协同作用，实现对高钙胁迫较强的忍耐性和较好的适应性。 　　关键词：金银花；钙胁迫；根系活力；MDA；保护酶活性 　　中图分类号： S567.7+90.1文献标志码： A文章编号：1002-1302（2017）17-0144-03 　　作者?介：谢元贵（1982―），男，硕士，副研究员、高级工程师，主要从事生态学、土地规划与水土保持方面的研究。E-mail：yuangui_xie@163.com。 　　通信作者：刘济明，博士，教授，主要从事植物生态学研究。E-mail：karst0623@163.com。贵州省是我国西南喀斯特地区中心区域，可溶性碳酸盐岩出露面积达13万km2，占全省土地总面积的73%，其生境极易退化，是我国六大脆弱生态系统之一[1-2]。喀斯特地区脆弱的独特生境表现为N、P、K极度缺乏，是高Ca/Mg的土壤环境，其钙元素的含量可达1%～3%[3]，是同纬度硅酸盐地区土壤CaO含量的2～3倍，石灰土中CaO主要以交换态存在，盐基离子中钙离子占90%以上[4]。Ca是植物生长必需的大量营养元素，具有独特的结构和生理功能，在植物生长中有着重要的功能。研究表明，Ca可以通过提高细胞质和细胞核中Ca2+浓度、促进磷酸钙沉淀、提高离子吸收、参与信号转导等方式直接参与植物抗寒[5]、热害[6]、干旱[7]、抗病[8]、重金属毒害[9]和盐胁迫[10-11]等逆境。 　　金银花（Lonicera japonica Thunb）别名忍冬，为忍冬属（Lonacera）半常绿多年生藤本灌木。金银花富含绿原酸、异绿原酸、木犀草苷等，具有良好的医用和经济价值，被作为国家重点治理名贵中药材之一[12]。其根系发达，适应性强，具有抗旱、耐涝、耐寒、耐瘠薄等特点，在贵州喀斯特地区具有较好的栽培前景。目前针对金银花逆境适应性的研究主要集中在干旱、重金属、盐（NaCl）胁迫等方面[13-16]，而关于Ca2+胁迫的研究却鲜有报道。考虑到贵州喀斯特地区高钙的土壤环境，为了探究金银花对喀斯特地区高钙环境的适应方式，本试验选取金银花高产品种“金翠蕾”，经不同钙浓度胁迫处理，研究金银花对高钙环境的生理生化适应机制，为金银花在贵州的推广种植、喀斯特石漠化地区植被恢复和生态重建提供参考。 　　1材料与方法 　　1.1供试材料 　　2013年9月中旬从湖南隆回万旺缘金银花购销有限公司选购“金翠蕾”灰毡毛忍冬银花品种的幼苗，移栽于贵州大学林学院苗圃，统一水肥管理，作为试验材料（炼苗约15 d）。待金银花苗恢复长势后，选择长势较为一致的金银花分别用蒸馏水和无菌水冲洗根系3次，植入另一石英砂基质中（底部内径24 cm，盆口内径29 cm，盆高22 cm），置于大棚内培养。石英砂经过10%的盐酸浸泡24 h，并依次用蒸馏水和去离子水反复浸泡冲洗至pH值恒定。 　　1.2试验设计 　　钙胁迫试验时段设置为10月初至12月初，设置0、5、20、30、40、50 mmol/L等6个钙离子浓度梯度，5 mmol/L Ca2+浓度的营养液作为对照（CK）。每处理3次重复，每个重复3盆。采用Hoagland+Arnon微量元素营养液，仅将钙浓度设为系列梯度，CaCl2作为钙源，NaNO3作氮源。每盆每次浇灌150 mL营养液，每2 d浇灌1次，每浇灌2次营养液之后，用去离子水淋洗石英砂1次，以避免盐分过多累积。试验过程中每10 d就要调换1次花盆位置，保证金银花在大棚内光照相对一致，胁迫处理时间为60 d。 　　1.3指标及测试方法 　　金银花叶片可溶性蛋白含量的测定采用考马斯亮蓝 G-250