江苏省连云港市2021届高三二轮复习生物专题十三 发酵工程 学案.docxVIP

二轮复习专题----生物技术与工程（发酵工程） 【学习目标】 1、知道果酒、果醋、腐乳、泡菜制作所需的菌种和制作原理，熟知影响菌种发酵的因素（生命观念） 2、分析培养基的成分及其作用；平板划线法和稀释涂布平板法的异同；选择培养基和鉴别培养基的区别；尝试进行果酒、果醋的制作，运用创新思维改进实验装置（科学思维） 3、设计实验探究微生物培养的条件及如何分离某种微生物等。（科学探究） 4、关注有害微生物的控制、关注食品安全，倡导健康生活方式（社会责任） 【构建网络·串联知识】 【要点整合·自测排查】 考点一 微生物的培养技术及应用 整合主干知识 1.微生物的培养基 微生物培养基、植物组织培养基和动物细胞培养液的比较 培养基 微生物培养基 植物组织培养基 动物细胞培养液 物理性质 液体、固体、半固体 液体 主要成分 水、无机盐、生长因子、 、 水、无机盐、 等有机营养、 、琼脂 水、 、氨基酸、促生长因子、微量元素、维生素、 培养原理 细胞增殖 细胞的全能性 细胞增殖 培养结果 微生物代谢产物或子代个体 新个体或细胞产物 大量新生细胞或细胞产物 相同点 无菌操作，需适当的温度、酸碱度等条件 选择培养基的选择方法 ①在培养基中加入某种化学物质抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的微生物种类的生长。例如，加入 可以分离出酵母菌和青霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。 ②改变培养基中的营养成分，选择相应的微生物。 碳源/氮源 选择的微生物类型 缺少碳源 微生物 缺少氮源 固氮微生物 分解尿素的微生物 以石油为唯一碳源 降解石油的微生物 以纤维素为唯一碳源 分解纤维素的微生物 ③改变微生物的培养条件，如温度或pH等。例如将培养基放在高温环境下培养，可以得到耐高温的微生物。 2.微生物培养的无菌操作 微生物培养工程中通常要设置 以检测培养基是否被污染。常见的无菌技术包括消毒和灭菌。两者最大的差别在于是否彻底杀死芽孢和孢子。 3.微生物的分离、筛选与计数 两种微生物分离纯化的方法： ，这两种方法都可以得到由一个细菌繁殖而来的菌落。 注意事项: ①培养基需冷却至50 ℃时才开始倒平板,倒平板时高于50 ℃则会烫手,低于50 ℃时若不能及时操作,培养基会凝固。 ②需要使锥形瓶的瓶口通过火焰灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基 ③平板冷凝后,要将平板倒置。平板倒置后,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的冷凝水落入培养基,造成污染。 ④在倒平板过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板应丢弃。 平板划线法中，三次灼烧接种环的目的不同：①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物；②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端；③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者。 两种微生物技术方法: 项目 间接计数法(稀释涂布平板法) 直接计数法 原理 样品稀释度足够高时,培养基表面生长的菌落都是单菌落,通过菌落数确定样品中的细菌数 利用血细胞计数板或细菌计数板在显微镜下计数计算样品中的细菌数 计算 公式 每毫升原液中所含的细菌数=(C/V)×M C:某稀释倍数下平板上平均菌落数; V:涂布平板所用稀释液的体积(mL); M:稀释倍数 以血细胞计数板为例: 每毫升原液中所含的细菌数=每小格的平均细菌数×400×10 000×稀释倍数 缺点 部分菌落不是单菌落 死细胞和活细胞都统计在内 误差 小于实际值 大于实际值 4.微生物分离与计数的两个实例 土壤中分解尿素的细菌的分离与技术： ①筛选菌株：利用 筛选菌株。 ②测定微生物数量的常用方法： 和 直接计数。 ③过程：土壤取样→制备培养基→ →涂布平板→培养与观察→菌落计数。 ④鉴定方法：含 指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂 ，则该菌能分解尿素。 分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理： 即：可通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 ②流程：土壤取样→选择培养→ →涂布平板→挑选菌落。 自测排查 1、判断有关培养基的制备与无菌操作叙述的正误 （1）在配制培养基时,除满足营养需求外,还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求。(　　) （2）消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。