NIPT质量控制技术审核 [兼容模式].pptxVIP

室 NIPT的室内质控、 和改善、 向 区 间质评、性能验证保 术能力审核 周 阳 广西壮族自治 临床检验中心 室内质控 检测的重复性，反映重复性的指标目前需要探讨（阴阳符合是起码） 明确结果的样本监控同批检测全过程，提供同批检测的把握度（需要 合理的问题检出能力）。实验测定是否有效，报告能否发出的参考。 阴阳性对照并不完全等同于室内质控 其他手段的质量保证措施也是室内质控 细 要 技术 节 实验室环境是好的：温湿度、可能存在的干扰（分区、灰尘、电磁、振动等） 仪器设备状态是好的：维护保养、定期校准 试剂是好的：性能验证、质检 实验室人员是有能力的：培训和授权问题 SOP：实验室最优操作的固化（仍需 持续改进），遵守SOP 过程监控：关键质控和室内质控 不确定样本的进一步分析处理：增加检测的把握度 疑难检验案例的处理 针对差错、失控等分析原因采取措施的质量持续改进 样本收集 血浆游离 DNA提取 文库构建 外周血采集和运输 规范 高效富集胎儿来源的游 离DNA，提高胎儿浓 度 ， 样本接收规范 样本数量 样本状态 运输时间 样本储存 检测安排及时性 检测方法准确 提取数量 提取质量 双重质控； 阴性质控品 阳性质控品 《孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与诊断技术规范》 《测序技术的个体化医学检测应用技术指南》 《国家卫生计生委对高通量测序试点实验室的要求》 参 考 依 据 上机测序 生物信息 分析 形成报告 优化的接头序列 提 高连接效率 测序质控 数据质控 报告质控 仪器状态 下机数据 数据质量 数据产量 发放数量 报告到达率 《医学实验室—质量和能力的专用要求》(ISO15189) 《NGS临检实验室标准指导方针》 美国医学遗传学会(ACMG) 《NGS临检标准化体系》 美国疾病控制与预防中心(CDC) 从NIPT标本采集、运送、到cf-DNA提取，应 重点关注哪些技术细节？ 检测全过程中，NIPT检测假阴性的原因有哪 些？道理是什么？ NIPT生物信息学分析中的重要质量关注点？ 基 NIPT检测到底会不会 因污染？ 若污染只导致假阳性吗？ 综合性实验室的设计或改造 生化 病理 分子 传染病 。。。。。。 控制污染和交叉污 各区独立 注意通风 方便工作 科研不影响临床 s 间质量评价（External Quality Asses ment，EQA） EQA是外部质量工具，其实质是与众多同行比对。 实验室能力水平的综合反映，实验室发现问题和改 进的机会。 有时也反映某一检测系统的不足，便于 家改进。 室间质评体系需要共同完善其科学性、公正性、有 效性。 不仅限于标本检测，还可以评估分析系统。 NIPT检测体系的性能 NIPT检测系统的性能是否优良既是各研发公司也是检测实 验室的共同关注和追求。 如何知道一个NIPT检测系统性能是否优良呢？ 能 性 确 人员 培训、考核、操作习惯、操作手法等 法 环境 温度、湿度、污染物、气压等 公司评估的性能不等同于在某一具体实验室表现的性能。 设备 仪器状态、检定校准、维护保养 方 SOP、质控标准 试剂 运输条件、保存状态 如何在现有技术水平 改善检出特异性是公 上 司 达到所用的具体系统 的事。否则系统待优 化 进一步提高检出， 研发的任务 应有性能是实验室 。 NIPT检测试剂性能验证 定 准 生物信息分析系统的验证。 所有的指标都要做 能验证吗？ 重复性:最基础。三次以上，阴阳性符合。其他指标（如Z值、胎儿浓度、数据量、T- score分布图等）一致，作为参考。有一 挑战性的标本更好（但要注意待测物的稳定）。 准确性:参考品检测、室间质评、与金标 （染色体核型分析）方法比。与权威实 验室交换样本检测。包括阴阳性和挑战性标本。 检出限:系统声明性能可检出的低胎儿浓度样本或参考品。 干扰:溶血、脂血、黄疸等样本。 要验证多少例呢？ 初步验证和持续性能监控与回顾分析 NIPT的性能验证指标7:抗干扰能力 验证方案： 选择本实验室已检测并已知核型的样品，取5例样品，覆盖阳性（包含T21、 T18和T13）及阴性样品，将每例样品平均分成4份例，形成4组： 第1组加一定量的阴性溶血样品使血红蛋白最终浓度达到0.3mg/ml； 第2组加一定量的阴性高胆红素样品使胆红素最终浓度达到2.5µmol/ml； 第3组加一定量的阴性高脂血样品使甘油三酯最终浓度达到4mg/ml； 第4组不作处理作为对照 验证通过标准： 每组符合率为100%为抗干扰能力验证通过 NIPT 的质量控制指标 《孕妇外周血胎儿游离DNA产前筛查与 诊断技术规范》 国卫办妇幼发（2016）45 号 本规范主要包括开展孕妇外周血胎儿游离DNA 产前筛查与诊断技术的基本要求、适用范围、 临床服务流程、检测技术流程以及质量控制指