免疫学实验：血脑屏障 溶菌酶 过敏性休克.pptVIP

血脑屏障及结构 血脑屏障为中枢神经系统提供解剖和生理上的保护，防止血细胞和大多数血源性物质进入中枢神经系统。 血管内皮细胞，紧密连接 基底膜 星状胶质细胞的血管周足（终足） 血脑屏障的功能 防止微生物，如细菌，以及大分子亲水物质，如蛋白质，抗生素等的出入。 允许小分子疏水物质，如O2，CO2 以及脂溶性激素的扩散。 参与营养物质以及代谢产物的主动运输，如葡萄糖。 溶菌酶的溶菌作用 证实体液中溶菌酶的存在及溶菌酶对革兰氏阳性菌的溶解作用。 原理 溶菌酶的杀菌机理是其作用于细菌细胞壁的粘肽层，粘肽是细菌的细胞壁主要成分。溶菌酶能切断粘肽结构中的N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β- 1,4糖苷键，破坏粘肽支架，使细胞壁破坏。由于细菌细胞壁的重要功能之一是保护细菌，即抗低渗，故细菌失去细胞壁的保护作用后，在低渗环境中可发生溶 解。溶菌酶的主要作用对象是革兰氏阳性菌。革兰氏阴性细菌细胞壁粘肽层外还有脂多糖、外膜和脂蛋白结构，故在一般情况下溶菌酶不易发挥直接做用。 动物血清过敏性休克 一型变态反应 马血清致敏豚鼠 二次注射马血清，导致过敏性休克 症状如烦躁，抓鼻，耸毛，打喷嚏，咳嗽，呼吸困难，大小便失禁，最终可致死亡。 * 染料锥兰经小鼠尾静脉注射，可进入血液循环并输送到全身各组织器官。但由于血脑屏障的存在，染料不能进入脑组织及脊髓。 实验原理： 实验步骤： 经尾静脉注射0.2 ml左右锥兰溶液; 等待 5-10分钟待染料被运送至小鼠全身；可观察到小鼠鼻尖、耳朵、眼睛等部位呈蓝色； 断颈法处死小鼠； 解剖小鼠，暴露脊髓及脑组织。观察其颜色，并于其他组织比较。 实验步骤： 将微球菌悬液与琼脂混匀，铺板； 在琼脂板上打孔，注意保持均匀间隔； 标记每个孔； 在阴性对照孔中加入生理盐水； 清水漱口后，用平皿收集唾液； 将唾液加至其它孔中； 37度孵箱过夜，观察溶菌现象。 *