罗氏试剂盒说明书 Insulin.docVIP

12179113001V8 胰岛素（Insulin）试剂盒说明书 2007-09， V 8 中文 PAGE 13 / NUMPAGES 5 Elecsys和cobas e 分析仪122 100测试 本试剂盒适用于以下分析仪 Elecsys 1010 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 ● ● ● ● ● 中文 主要用途 该免疫测定法适用于人血清和血浆胰岛素的体外定量检测。胰岛素检测用于各种糖代谢紊乱的诊断和治疗，包括糖尿病和低血糖症。 Elecsys和cobas e免疫分析仪的检测原理是电化学发光免疫法（ECLIA）。 概述1,2,3,4,5 胰岛素是一种分子质量约为6000道尔顿的肽类激素，由胰岛B细胞分泌，通过门静脉和肝脏进入血循环。一般来讲，胰岛素以脉冲的形式释放，通常葡萄糖循环比胰岛素循环提前两分钟1。胰岛素分子由两条多肽链组成，α-链含21个氨基酸，β-链含30个氨基酸。胰岛B细胞合成单链形式的前胰岛素原，然后立即分解为胰岛素原，在特异性蛋白酶作用下，胰岛素原分解为胰岛素和C-肽进入血循环。有一半的胰岛素还留在肝脏内。循环中的胰岛素半衰期为3-5分钟，优先在肝脏内降解；而胰岛素原和C-肽的失活或排泄在肾脏进行。令人惊讶的是，在进化过程中，胰岛素的氨基酸顺序并未发生改变，这使得在人胰岛素基因工程发展之前，采用猪或牛胰岛素治疗糖尿病成为可能2。 胰岛素的作用是由特异性受体介导的，主要包括帮助肝脏、脂肪组织和肌肉组织的糖摄取，也就是所谓的降糖作用。 血清胰岛素的检测主要用于有低血糖症症状的患者，主要用来确定葡萄糖/胰岛素的比值以说明关于胰岛素分泌的问题如：甲苯磺丁脲试验、胰高血糖素试验或评价口服糖耐量试验和饥饿激发试验。 尽管经常通过检测C-肽评估胰腺胰岛素的合成，但是，仍然需要检测胰岛素。例如，非人源胰岛素治疗用药可能导致抗胰岛素抗体的形成。这种情况下，血清胰岛素浓度的检测就可以反映游离的、具有生物活性的胰岛素的量，而C-肽的检测只能反映患者总的内源胰岛素的分泌情况3，4。 胰岛素代谢紊乱对一些代谢过程的影响很大。过低浓度的游离的具有生物活性的胰岛素会导致糖尿病的发生，产生这种现象的可能原因有胰岛B细胞的破坏（Ⅰ型糖尿病），胰岛素活性降低或胰腺合成减少（Ⅱ型糖尿病），胰岛素循环抗体，胰岛素延迟释放或胰岛素受体缺乏（或不足）。 另一方面，自发的、非调节的胰岛素分泌是低血糖症的主要原因。糖异生作用被抑制而导致这种疾病的发生，比如，严重的肝衰竭或肾衰竭、胰岛细胞瘤或胰岛细胞癌。人为因素也可促使低血糖的发生。在3%糖耐量降低的患者在中，在一段时间内会恶化成糖尿病。在妊娠期间的糖耐量降低一般是需要治疗的，胎儿的高死亡率使得严密监控成为必要。 Elecsys Insulin法的检测原理是人胰岛素特异性单克隆双抗体夹心法。 检测原理 抗体夹心法，总检测时间：18分钟 第一次孵育：20μl样本、1个生物素化胰岛素特异性单克隆抗体和1个钌（Ru）a标记胰岛素特异性单克隆抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。 第二次孵育：加入包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，通过生物素和链霉素的相互作用，复合物与磁珠结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 仪器自动通过2点校正定标曲线计算获得检测结果，试剂条码提供标准曲线。 试剂－工作溶液 M Streptavidin-coated microparticles（透明瓶盖），1瓶，6.5mL：包被链霉素的磁珠微粒0.72mg/mL；防腐剂。 R1 Anti-insulin-Ab～biotin（灰盖），1瓶10ml：生物素化抗胰岛素单克隆抗体（鼠），1mg/L；MES缓冲液 50mmol/L，PH 6.0；防腐剂。 R2 Anti-insulin-Ab～Ru(bpy)32+（黑盖），1瓶10ml：钌标记的胰岛素单克隆抗体（鼠），1.75 mg/L，MES冲液 50mmol/L，PH6.0；防腐剂。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 使用本试剂盒时必须遵循所有试验室试剂操作注意事项。 所有废弃物必须按照当地法规进行处置。 根据客户需要提供安全资料表。 避免试剂和各样本（样本、定标品和质控品）产生气泡。 试剂处理 该试剂盒为即用型，请勿分开使用。 试剂相关信息可以通过试剂条形码获取