罗氏试剂盒说明书 Cortisol 12179237001V14.docVIP

12179237001V14 皮质醇（Cortisol）试剂盒说明书 2009-05， V 14 中文 PAGE 8 / NUMPAGES 9 Elecsys和cobas e 分析仪122 100测试 本试剂盒适用于以下分析仪 Elecsys 1010 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 ● ● ● ● ● 主要用途 用于体外定量检测人血清、血浆、尿液和唾液中皮质醇。皮质醇检测用于鉴别和治疗肾上腺功能失调。 Elecsys和cobas e免疫分析仪的检测原理是电化学发光免疫法（ECLIA）。 概述 皮质醇（氢化可的松）是机体最主要的糖皮质激素，对维持机体的多项生理机能有重要作用。与其它糖皮质激素类似，皮质醇由共同的胆固醇前体在肾上腺皮质束状带合成。血循环中约有90%的皮质醇与皮质类固醇结合球蛋白（CBG）和白蛋白结合后进行运输。仅有少量的游离皮质醇与其受体发生反应。1皮质醇最重要的生理作用是提高血糖水平（提高糖异生和糖分解）、抗炎和免疫抑制反应。皮质醇由肾上腺合成和分泌并受下丘脑-垂体-肾上腺皮质-轴的负反馈调节。如果血中的皮质醇浓度减低，下丘脑则分泌促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）。CRH能促进垂体释放促肾上腺皮质激素（ACTH）。ACTH能促进肾上腺合成和分泌皮质醇。皮质醇本身对垂 体和下丘脑起负反馈作用。此外压力能够促进皮质醇的分泌。1 血清皮质醇的浓度具有昼夜节律性变化。1通常最高峰值出现在清晨（700nmol/L或25.4mg/dL），随后逐渐降低，到夜间可降至峰值浓度的一半左右。因此在解释结果时，明确采血时间是很重要的。 检测患者血循环中皮质醇的含量可用于诊断肾上腺、垂体和下丘脑的机能是否正常。2，3因此检测血清皮质醇的浓度可用监测多种疾病，如浓度明显增高的库欣氏综合征4，5或浓度明显降低的艾迪生病。同时也可用于库欣氏综合征使用地塞米松抑制治疗或艾迪生病使用激素替代治疗的疗效监测。 库欣氏综合征实验室诊断的另一选择是检测24小时尿液中的皮质醇浓度，因为尿液中排泄的皮质醇不受昼夜节律性分泌的影响。6这种方法能够准确的区分健康人与库欣氏综合征患者。尿液中排泄的皮质醇均未与转运蛋白结合，因此被称为尿游离皮质醇（UFC）。通常尿游离皮质醇与血中具有生物活性的游离皮质醇具有一定的比例关系。1 近来研究发现对于库欣氏综合征的诊断，检测夜晚唾液中的皮质醇比检测尿液游离皮质醇更有价值。7，8，9，10 检测夜晚唾液中的皮质醇特别适用于儿童、精神病患者以及由于不同的压力因素影响肾上腺皮质过度分泌肾上腺类固醇激素的个体。 Elecsys 皮质醇检测采用竞争法原理，使用特异性识别皮质醇的多克隆抗体。通过达那唑释放样本中与蛋白结合的内源性皮质醇，并与试剂中钌复合物a标记的外源性皮质醇衍生物竞争结合生物素链接的抗体。 尿液检测可通过二氯甲烷萃取以降低其它物质的干扰。 未经处理的唾液经过离心可直接检测。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){}三联吡啶钌 检测原理 竞争法，总检测时间：18分钟 第一次孵育：20μl样本、生物素化皮质醇特异性抗体和钌复合物标记的皮质醇衍生物一起孵育。被标记的抗体结合位点部分被样品分析物占据，部分被钌标记的半抗原占据，取决于样品中分析物的浓度和各自免疫复合物的形成。 第二次孵育：加入包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，通过生物素和链霉亲和素的相互作用，复合物结合到磁珠微粒上。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合物化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 仪器通过2点定标校正试剂条形码包含的厂商定标曲线，自动计算得到检测结果。 试剂－工作溶液 M 包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5mL：包被链霉亲和素的磁珠微粒0.72mg/mL；防腐剂。 R1 生物素化的抗皮质醇抗体（灰盖），1瓶9mL：生物素化抗皮质醇多克隆抗体（羊）浓度90ng/mL，MESb缓冲液100mmol/L，pH 6.0。防腐剂。 R2 Ru(bpy)32+标记的皮质醇肽段（黑盖），1瓶9mL：钌复合物标记的皮质醇衍生物（合成），25 ng/Ml; 达那唑 20ug/mL;MES冲液 100mmol/L，PH6.0；防腐剂。 b)MES=2-溴-乙烷磺酸 警告和注意事项 仅用于体