罗氏试剂盒说明书 N-MID Osteocalcin 12148382001V11.docVIP

12148382001V11 骨钙素（N-MID Osteocalcin） Elecsys 和 cobas e 分析仪 PAGE 5 / NUMPAGES 6 2008-02, V 9 122 100测试 本试剂盒适用的分析仪 Elecsys 1010 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 · · · · · 主要用途 用于体外定量检测人体血清或血浆中的N-MID Osteocalcin。该检测适用于抗骨重吸收治疗（如骨质疏松症和高钙血症）的疗效评估 Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 骨钙素是骨基质中最重要的一种特异性非胶原蛋白，是骨特异的依赖于维生素K发挥作用的钙结合蛋白。骨钙素分子含49个氨基酸，分子量约5800D。其最多含有3个γ-羧基谷氨酸残基（bone-GLA-protein,BGP）。 骨钙素在骨形成过程中由成骨细胞生成，此过程依赖于维生素K，同时维生素D3有促进骨钙素生成的作用。成骨细胞产生的骨钙素一部分被吸收成为骨基质的组成部份，一部分被释放进入外周血循环。因此，血清（或血浆）中骨钙素的含量与各种骨代谢疾病的骨转换率变化相关，如质疏松症、原发或继发性甲状旁腺功能亢进或Paget’s病等。 因此骨钙素作为骨转换标志物，应用于上述疾病的药物疗效观察（双磷酸盐或激素替代治疗，HRT）。 血循环中含有整分子骨钙素（氨基酸1-49）和N－MID大分子片断（氨基酸1－43）。整分子骨钙素在外周血中不稳定，羧基端43-44间的氨基酸易被蛋白酶水解，裂解下来的N－MID大分子片断比较稳定。 Elecsys N-MID骨钙素检测采用了针对骨钙素N端片段和N－MID端片段决定簇的二种特异性的单克隆抗体。因此能够检测出稳定的N-MID 片段和尚未裂解的整分子骨钙素。检测不受不稳定的骨钙素C端片段（氨基酸43－49）影响，因此保证了实验室获得稳定的结果。 检测原理 双抗体夹心法，总检测时间：18分钟 第一次孵育：20μl样本、生物素化的单克隆N－MID骨钙素特异性抗体以及钌复合物标记a的单克隆N－MID骨钙素抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。 第二次孵育：添加包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电 压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){}三联吡啶钌 试剂－工作溶液 M 包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。 R1生物素化的抗N－MID骨钙素抗体（灰色瓶盖），每瓶10ml：生物素化的抗N－MID骨钙素抗体（鼠源）约1.5mg/L，磷酸盐缓冲液100 mmol/L，Ph6.0; 防腐剂。 R2 钌复合物标记a的抗N－MID骨钙素抗体（黑色瓶盖），每瓶10ml：钌复合物标记a的抗3－MID骨钙素抗体（鼠源）1.5mg/L；磷酸盐缓冲液100mmol/L，Ph6.0; 防腐剂。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。 试剂处理 试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。 试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。 储存及稳定性 存放于2－8℃。 请垂直摆放Elecsys N－MID骨钙素试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。 稳定性： 未开封试剂，2－8℃ 有效期内均可使用 开封试剂，2－8℃ 12周 放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上 8周 放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上 8周 放置分析仪Elecsys 1010上 8周（试剂交替放置于冰箱和20-25℃的分析仪中，持续开盖的情况下至多20小时） 样本的采集和准备 下列类型的样本符合检测要求，并且样本量要充足。 血清样本须用标准试管收集。 肝素锂和K3-EDTA抗凝的血浆都适用。 标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距±2倍分析灵敏度(L