罗氏试剂盒说明书 Anti-HCV 12177153001V3.docVIP

12177153001V3 丙型肝炎病毒抗体（Anti－HCV） 2008-02, V 3 中文 PAGE 1 / NUMPAGES 7 Elecsys 和 cobas e 分析仪190 100测试 本试剂盒适用的分析仪 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 · · · · 主要用途 Elecsys Anti-HCV试剂盒用于体外定性检测人体血清或血浆中丙型肝炎病毒（HCV）抗体。 Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 丙型肝炎病毒于1989年被首次证实1，是一种全球流行的非甲、非乙型肝炎，输血是其最主要的感染途径。。HCV感染常导致慢性肝炎和肝硬化，并可能进展为肝细胞肝癌2。临床常伴有冷球蛋白血症和各种风湿性疾病的症状表现3。 丙型肝炎病毒是黄病毒科的一种单链正股RNA病毒，有衣壳。病毒基因组长约9.5kb，编码包括结构区和非结构区在内的3000个氨基酸多肽4。如同其他RNA病毒，HCV在复制过程中发生变异而形成多种变异株。全世界至少报道了11个不同的基因型和多种亚型以及病毒变异体5。不同基因型的病毒可能影响疾病的严重程度和治疗效果6,7。丙型肝炎病毒主要通过被污染的血液和血制品传播，通过人体液传播的概率较小8。 Anti-HCV抗体检测可单独使用，或和其他检测（如HCV-RNA）联合使用，检测个体是否感染丙型肝炎病毒和筛选被HCV污染的血液和血制品。 Elecsys Anti-HCV试剂盒使用重组的核心区NS3和NS4蛋白肽抗原来检测Anti-HCV抗体。 检测原理 ‘夹心法’法，总检测时间：18分钟 第一次孵育：40μl样本、60μl生物素化HCV抗原以及60μl钌复合体标记a的HCV抗原一起孵育，反应形成“三明治”样抗原－抗体复合体。 第二次孵育：添加包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，抗原－抗体复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电 压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 Elecsys软件自动将样本产生的光电信号与定标产生的Cutoff值相比较获得检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){)三联吡啶钌 试剂－工作溶液 M 包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂 R1 缓冲液（灰色瓶盖），每瓶7ml：HEPESb缓冲液，pH5.0 R2 缓冲液（黑色瓶盖），每瓶7ml：HEPES缓冲液，pH5.0 R1a 冻干的生物素化HCV抗原（白色瓶盖），每瓶1.2ml溶解液溶解 R2a 冻干的钌复合物标记HCV抗原（黑色瓶盖），每瓶1.2ml溶解液溶解。 R1b 瓶R1a的溶解液（白色瓶盖），每瓶1.4ml：水，经过防腐处理。 R2b 瓶R2a的溶解液（黑色瓶盖），每瓶1.4ml：水，经过防腐处理。 Cal1 阴性定标液1（白色瓶盖），2瓶，每瓶1.3ml：人血清， 经过防腐处理。 Cal2 阳性定标液2（黑色瓶盖），2瓶，每瓶1.3ml：人抗HCV抗体阳性血清，经过防腐处理。对于HBsAg和抗-HIV 1/2无反应。 b)HEPES=[4-(2-hydroxyethyl)-piperazino]-ethane sulfonic acid 4-羟乙基哌嗪乙磺酸 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 所有人源性物质必须视为有潜在感染性。 来源于人血液的所有产品由献血员提供，经特殊制备而成，经检测HBSAg、HCV抗体(仅Cal 1)、HIV抗体，均为阴性。 所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法令98/79/EC附件II列表A。 含有抗－HCV的血清（Cal2）经β-丙稀内酯和UV射线灭活。 但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人样本一样仔细处理。接触者必须遵循健康专业机构相应的法规9.10。 若试剂超过保质期，则不能再使用。 避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。 Elecsys Anti-HCV检测具有较高的灵敏度。在样本前处理时注意避免交叉污染。 试剂处理 试剂盒中的试剂R1和R2为非即用型，需要事先处理。（具体操作参见“工作溶