罗氏试剂盒说明书 P1NP.docVIP

12177269001V6 总I型前胶原氨基末端肽（total P1NP） Elecsys 和 cobas e 分析仪 PAGE 1 / NUMPAGES 7 2007-07, V 8 190 100测试 本试剂盒适用的分析仪 Elecsys 1010 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 · · · · · 主要用途 用于体外定量检测人体血清或血浆中的总P1NP。该检测适用于绝经后女性骨质疏松症患者1，2，3和Paget’s骨病患者4，5，6的疗效评估。 Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。 临床应用 骨基质的有机成分中，I型胶原的含量超过90%7。纤维母细胞和成骨细胞先合成I型前胶原，后者继而形成I型胶原。I型前胶原在其氨基端（N端）和羧基端（C端）存在延伸肽链。这些延伸肽链（前肽）在前胶原转化为胶原的过程中将被特异性的蛋白酶切割。当成熟的胶原形成后会沉积于骨基质中。本试剂检测的是氨基端的延长肽链，即1型前胶原氨基末端肽（P1NP）。P1NP反映的是I型胶原的沉积情况，因此是作为一项骨形成标志物8，9。在I型胶原的形成过程中，P1NP被释放至细胞外间隙最终进入血液。P1NP为三聚体形式（由三聚体胶原转化而来），但很快会在热降解作用下成为单体形式10，11。Elecsys P1NP试剂检测的是血液中所有的P1NP形式，因此称为总P1NP。 检测原理 双抗体夹心法，总检测时间：18分钟 第一次孵育：20μl样本和生物素化的单克隆P1NP特异性抗体一起孵育。 第二次孵育：添加钌复合物标记a的单克隆P1NP抗体和包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，形成双抗体-抗原夹心复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。 仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy){}三联吡啶钌 试剂－工作溶液 M 包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml：包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。 R1生物素化的anti-P1NP抗体（灰色瓶盖），每瓶10ml：生物素化的anti-P1NP抗体（鼠源）约2.5mg/L，磷酸盐缓冲液100 mmol/L，Ph7.2; 防腐剂。 R2 钌复合物标记a的anti-P1NP抗体（黑色瓶盖），每瓶8ml：钌复合物标记a的anti-P1NP抗体（鼠源）2.5mg/L；磷酸盐缓冲液100mmol/L，Ph7.2; 防腐剂。 警告和注意事项 仅用于体外诊断。 在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。 专业人员可要求获得安全数据报告。 避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。 试剂处理 试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。 试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。 储存及稳定性 存放于2－8℃。 请垂直摆放Elecsys 总P1NP试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。 稳定性： 未开封试剂，2－8℃ 有效期内均可使用 开封试剂，2－8℃ 8周 放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上 8周 放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上 8周 放置分析仪Elecsys 1010上 4周（试剂交替放置于冰箱和20-25℃的分析仪中，持续开盖的情况下至多20小时） 样本的采集和准备 下列类型的样本符合检测要求，并且样本量要充足。 血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。 肝素锂和K3-EDTA抗凝的血浆都适用。 标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距±2倍分析灵敏度(LDL)，相关系数0.95。 稳定性：15-25℃可保存24小时，2-8℃可保存5天，-20℃可保存6个月。标本至多反复冻融5次，否则将影响检测结果。 选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。 有沉淀的样本检测前必须先作离心处理。 避免使用添加叠氮化合物的样本和质控品。 检测前，样本、定标液及