蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性的测定.pdfVIP

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  • 2023-03-08 发布于上海
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蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性的测定.pdf

蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活性的测定 蔗糖是重要的光合产物,为植物体内运输的主要物质,又是碳水化合物的暂贮形式之一。蔗糖合 成酶 (SS)、蔗糖磷酸合成酶 (SPS)是植物体内催化其合成的两种酶。这两种酶在生物体内的 功能有所不同。蔗糖合成酶以游离果糖为受体,蔗糖磷酸合成酶以果糖-6-磷酸为受体。后者形 成的蔗糖磷酸,在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系统看 作是蔗糖合成的主要途径,而把蔗糖合成酶看作是蔗糖分解或形成核苷酸葡萄糖的系统。UDPG 是合成蔗糖的葡萄糖供体,故催化UDPG 合成的UDPG 焦磷酸化酶活力的高低与蔗糖合成的速 率有十分密切的关系。 1.仪器设备 冷冻离心机、恒温水浴、分光光度计。 2. 操作方法 1)酶液提取 (1)试验材料可根据实验需要,择选各种植物叶片、籽实等。 (2)粗酶液制备:称取5~10g 去掉主叶脉的植物叶片,洗净剪碎,置于预冷的研钵中 (如叶片 纤维粗,可先将叶片用液氮固定后磨细),加4 倍体积的缓冲液A (100mmol/LTris-HCl,pH7.0; 10mmol/LMgCl ;2mmol/L EDTA;2%乙二醇;20mmol/L 巯基乙醇)。在冰浴中提取,经4 2 层沙布过滤弃残渣,7000×g 离心30min,取上清液用硫酸铵分步沉淀,

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