粮食与食品微生物学 课件 12.2 菌种保藏.ppt

第五章：微生物学遗传学 知识点2：菌种保藏 第四节：基因工程和菌种保藏 一、菌种保藏意义 二、菌种保藏原理 三、菌种保藏方法 四、菌种保藏机构 本知识点需要解决的问题 一、菌种保藏意义 微生物菌种是国家重要的自然资源 微生物容易受环境影响，产生变异，可能导致其优良性状的劣化或死亡 优良菌株的获得又是一项艰苦的工作 为了在生产中，较长时期内保持其优良性状，阻止或减缓其退化和死亡。就必须做好菌种保藏工作 二、菌种保藏目的及原理 目的 原理 创造不利于菌种生长的一切条件（可组合），使其代谢处于缓慢、生长受到抑制的休眠状态 使菌种 不生长 不死亡 不污染 不降低或不丧失其优良性状 以尽量延长使用时间 返回本节 不利于菌种生长的条件（组合） 低温 干燥 缺氧 缺营养 不利生长条件 三、菌种保藏法 菌种保 藏方法 斜面低温 保藏法 液体石蜡 保藏法 砂土 保藏法 自然基质 保藏法 冷冻干燥 保藏法 根据菌种 保藏原理 需要挑选 典型、优良 纯正的菌种 及细胞 1、斜面低温保藏法 特点 简便，无需特殊设备保藏时间短（1~6个月） 易污染及退化适用于各类菌种 过程：菌种---斜面培养基---培养---检查---置4~6℃冰箱---传代培养---继续保藏 返回本节 如用石蜡密封，能延长保藏期（2-3年） 适合于各类菌种保藏的培养基有哪些? 作答 主观题 10分 2、液体石蜡保藏法 无菌检验 注入种管 淹没斜面约1cm 矿油处理 灭菌：121 ℃、60--80min去水：80℃烘至无色透明 口堵胶塞 用时转管再转管 返回本节 石蜡封口 4 ℃冰箱保藏—竖放，可保藏2—3年，甚至5年 返回本节 液体石蜡保藏法为什么不适合于利用石蜡的微生物保藏? 作答 主观题 10分 3、砂土保藏法（产孢子或芽孢的菌） 将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法 沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛 步骤 基质的处理 黄沙—10%HCl贫蒺的土 装管 1cm 具有低温、干燥、阻氧、无营养等条件，保藏时间长（2-5年） 特点 灭菌 接菌 悬液 混匀 真空干燥 返回本节 4、自然基质保藏法 基质的处理 麦粒浸透、煮熟麸皮拌湿 装管 防衰老保藏时间长转接后生长旺易污染，灭菌要彻底 特点 灭菌 接种 培养 干燥器去水 返回本节 5、冷冻干燥保藏法 原理：先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。 步骤 准备安瓿管 准备菌种 制备菌悬液（牛奶） 分装（0.2毫升） 冷冻真空干燥器 封口 冷冻真空干燥器 四、菌种保藏机构 系统菌种保藏工作开始于19世纪末20世纪初 世界上约有 550个菌种保藏机构 著名的有美国典型菌种保藏中心(简称ATCC﹐马里兰)﹕1925年建立，是世界上最大的﹑保存微生物种类和数量最多的机构，约29000株 荷兰、英国、日本等菌种保藏中心 延伸：世界菌种保藏联合会 1970年 8月在墨西哥城举行的第10届国际微生物学代表大会上成立了世界菌种保藏联合会（简称WFCC） 确定澳大利亚昆士兰大学微生物系为世界资料中心，用计算机储存全世界各菌种保藏机构的有关情报和资料 1972年出版《世界菌种保藏名录》 菌种保藏与中国 1953年，方心芳院士在北京建立我国第一个菌种保藏机构 中国于1979年成立了中国微生物菌种保藏管理委员会(简称CCCCM﹐北京)，按行业分别保藏，即： 中国（农业、工业、医学细菌、兽医微生物）等四个菌种保藏管理中心