玉米芯和棉籽壳制备低聚木糖的预处理方法.docxVIP

玉米芯和棉籽壳制备低聚木糖的预处理方法 木质素被认为是植物进化酶分解的限制因素，主要与其他成分（如木聚糖复合）引起的自然状态有关。并且现已证实木聚糖与木质素是通过共价键连接的,其具体连接方式为:木聚糖的阿拉伯糖残基和葡萄糖醛酸残基同木质素的苯环通过共价键连接在一起。正是由于木质素等的存在使得酶解法制备低聚木糖效果不理想,所以把脱除木质素的效果作为判断各种预处理方法好坏的标准。 本文就不同的预处理方法分别处理玉米芯和棉籽壳进行研究,对于酶法生产低聚木糖具有重要的现实指导意义。 1 材料和方法 1.1 紫外分光光度计 玉米芯,颗粒大小2 mm以下:产地河南省;棉籽壳,带有绒毛只经过粗粉碎:产地河南省。 紫外可见分光光度计(UV-2000型,上海尤尼柯有限公司;p H计(p H211):HANNA instruments;手提式不锈钢蒸汽杀菌锅:上海三中医疗器械有限公司;马福炉(RJM-28-10):沈阳市电炉厂。 1.2 方法 1.2.1 稀硫酸溶液预处理 称取一定量的原料(玉米芯、棉籽壳),加入10倍体积0.15%稀硫酸溶液,在70℃浸泡12 h,然后水洗至p H值5.0左右,在125℃蒸煮2 h。上述预处理之后,用清水洗至洗出液呈中性,烘干,待用。 1.2.2 浸泡时间,洗出液 称取一定量的原料(玉米芯、棉籽壳),加入5.5倍的2.0%Na OH溶液,在室温下浸泡10 h~14 h,然后用清水充分洗至无碱液残留,洗出液呈中性,烘干,待用。 1.2.3 ph值对h2溶液活化的影响 称取一定量的原料(玉米芯、棉籽壳),加入10倍体积2.0%,p H值11.5(4 mol/L Na OH调)H2O2溶液,在室温下浸泡12 h~14 h。上述预处理之后,用清水洗至洗出液呈中性,烘干,待用。 1.2.4 木聚糖含量测定 500 mg待测样品置于研钵中,加入72%(质量百分数)的硫酸5 m L,研磨1 h至样品完全呈均匀乳状,将研磨的乳浆状物全部转入250 m L容量瓶中并定容。充分混合均匀后,滤纸过滤,清液用地衣酚-盐酸法测定总糖含量(g/L),按下式计算木聚糖含量。 木聚糖含量=测定总糖含量×250×0.88/500×100% 1.2.5 木质素含量测定 准确称取样品(玉米芯或棉籽壳)1.000 0 g(精确到0.000 1),用定性滤纸包好,放入索氏抽提器中,加入醇苯混和液(乙醇∶苯=1∶1体积比)100 m L于水浴上抽提6 h~8 h,取出滤纸包风干,并用洁净毛刷将包中试样刷入500 m L干燥烧杯中,加入10 m L沸蒸馏水,10 min后将烧杯置于冷水中,搅拌,加入25 m L 86%硫酸溶液,18℃~22℃水浴中保持4 h,浸入冷水浴15min,用预先恒重的古氏坩锅抽滤,用70℃蒸馏水洗涤至洗液用10%Ba Cl2溶液测试不出混浊为止,吸干滤纸,取下坩锅,用蒸馏水将外壁吹洗干净,移入烘箱,105℃烘干至恒重,记录重量(G1)。将该坩锅移入马福炉,500℃~550℃灼烧0.5 h,再在105℃烘干恒重,记录重量(G3)。 木质素含量=(G1-G3)×100×100%/G2×(100-W) 式中,G1:恒重后坩锅连同残渣重,g;G2:样品玉米芯重,g;G3:灼烧后坩锅连同灰分重;W:样品中玉米芯粉含水量。 1.2.6 原料中的水特征 水分含量的测定参照GB5497-2004,105℃恒重法。 1.2.7 原料中的灰烬测定 采用550℃灼烧法。参照GB/T 6438-2004。 2 结果与讨论 2.1 棉籽壳预处理对木质素的影响 从图1、2中可以看出,碱性H2O2预处理后的玉米芯和棉籽壳木质素含量大幅度降低了。稀酸、稀碱和碱性H2O2预处理得到玉米芯中的木质素含量分别降低了29.3%、44.0%、70.4%,棉籽壳中的木质素含量分别降低了15.5%、22.4%、67.5%。 可见,不同的预处理方法都能与原料中的木质素发生不同的反应,且不同程度地除去木质素。这可能是由于木质素的结构单元是苯丙烷,同时在苯环上具有甲氧基存在;另外,木质素的分子结构中存在着芳香基、酚羟基、醇羟基、羰基、甲氧基、羧基、共轭双键等活性基团,可以进行氧化、还原、水解、醇解、酸解、光解、酰化、磺化、烷基化等许多化学反应。 2.2 之后木聚糖含量的变化 从表1、2中可以看出,经过不同的预处理之后木聚糖含量(占干重)发生了变化。其中碱性H2O2预处理玉米芯和棉籽壳的木聚糖含量变化最大,得到的木聚糖含量最高。 3 预处理玉米芯和棉籽壳的脱木质素效果 杨瑞金报道了采用稀酸处理玉米芯,蒸煮条件为135℃、30 min,而本研究采用的是125℃、120 min,木聚糖和木质素得到了部分分离,但仍然有相当一部分与木质素结合在一起。艾志录报道了稀碱法预处理玉米芯,其木质素含