甲维盐和阿维菌素对南方根结线虫病的生物活性.docxVIP

甲维盐和阿维菌素对南方根结线虫病的生物活性 根结线虫病是影响番茄的主要疾病之一，通常发生在中国的南北地区。特别是在设施农业中，番茄敏感品种常年出现，导致根结线虫病的普遍存在，造成严重的经济损失。我国目前开发的防治植物根结线虫的主要品种有:甲基异硫磷、克百威、灭线磷、克线磷、辛硫磷、米乐尔、丁硫克百威、棉隆、威百亩等。这些品种中有的由于多年使用,已产生严重的抗药性,而且有的品种毒性大,残效长,对环境污染严重,已被禁用。 阿维菌素(Avermectin)是20世纪80年代以来开发的具有广谱杀虫、杀螨、杀线虫活性的生物农药,对果蔬根结线虫病具有很好的防治效果;甲胺基阿维菌素苯甲酸盐(Emamectin benzoate)是阿维菌素的衍生物之一,其性能优于阿维菌素,具有活性高、毒性低、对有益生物安全、害虫不易产生抗药性等优点,目前国内外主要用于蔬菜地中小菜蛾、甜菜夜蛾等难治害虫的防治,但仍未见其用于防治根结线虫病的报道。为了探索该衍生物对南方根结线虫病的防治效果,本研究以该衍生物为有效成分制剂对南方根结线虫进行了室内毒力测定、盆钵药效试验,同时开展其对番茄的安全性评估,为其开发和应用提供依据。 1 材料和方法 1.1 种子1菌株 药剂:0.2%高渗甲胺基阿维菌素苯甲酸盐(Emamectin benzoate,简称:甲维盐)乳油(保尔EC,山东京博农化有限公司);1.8%阿维菌素(Avermectin)乳油(浙江海正化工股份有限公司)。 番茄:超级大明星(广东湛江市大地蔬菜种子有限公司)。将经催芽后的番茄种子播种于灭菌土中,出苗后选取长势一致的植株移栽于装有灭菌土、直径为6 cm的塑料杯中,在温室中培养待用。 线虫:从海南大学儋州校区环境与植物保护学院基地茄子根结线虫病病根上剖检得到雌虫和幼虫,经形态鉴定为南方根结线虫(Meloidogyne incognita),并用单卵块扩繁法于番茄苗(1个月苗龄)上纯化扩大培养,30 d后挑取番茄苗病根上的线虫卵块,经0.5%次氯酸钠消毒3 min后置于25 ℃培养箱中孵化3~4 d,将新鲜孵化得到的二龄幼虫配制成600条·mL-1和1 000条·mL-1的悬浮液备用。 1.2 疗效评价标准 将0.2%高渗甲维盐EC和1.8%阿维菌素EC分别稀释:500倍(有效成分4.00 mg·L-1)、1 000倍(2.00 mg·L-1)、1 500倍(1.33 mg·L-1)、2 000倍(1.00 mg·L-1)、3 000倍(0.67 mg·L-1)和4 000倍(0.50 mg·L-1)作为处理液,吸取各稀释药液5 mL于培养皿(直径6 cm)中,将1 mL线虫悬浮液(600条·mL-1)分别滴入装有各稀释药液的培养皿内混匀。各处理3次重复,无菌水为对照。将各处理培养皿用封口膜封严,置于25 ℃培养箱中24 h,再分别将各处理和对照皿中的线虫悬浮液倒入400目筛中滤去药液,用灭菌水冲洗并回收线虫于计数皿中,镜检线虫死亡情况,计算校正死亡率,求得毒力回归方程并计算LC50及LC95值。 校正死亡率=(处理死亡率-对照死亡率)/(1-对照死亡率)×100% 1.3 植株生长情况测定 选取培育40 d长势一致的番茄苗,按每株1 000条幼虫的接种量将根结线虫二龄幼虫悬浮液分别滴注于植株的根部。24 h后药液灌根:两药剂均设500倍液、1 000倍液和1 500倍液,每株20 mL,另设CK1(仅接种线虫)和CK2(仅加0.2%甲维盐1 500倍液,不接种线虫)和Control(空白对照:不加药液也不接种线虫),共9个处理,各处理重复3次。所有植株随机排列,栽培条件均匀一致。 处理后30 d,缓慢取出植株根系洗净,分别测量株高、地上部鲜重及根系鲜重,记录发病情况,计算病情指数、相对防效、各处理根表形成的卵块数与CK1根表形成的卵块数的比值(即繁殖指数),并按Duncan′s新复极差法测验各处理的差异显著性。 病情分级标准:0级,根部无根结;1级,根部有根结1~25个;2级,根部有根结26~75个;3级,根部有根结76~150个;4级,根部有根结151~250个,少数根结上有再次根结;5级,根部有根结251个以上,多数根结相互连结成根结团块。 病情指数=∑(各级植株数×级数)/(调查总株数×5)×100% 相对防效=(CK1每克根根结数-处理每克根根结数)/CK1每克根根结数×100% 繁殖指数=处理产生卵块数/CK1产生卵块数 2 结果与分析 2.1 阿维菌素lc50 从致死中浓度来看,甲维盐对南方根结线虫的毒性比阿维菌素高,甲维盐LC50仅为0.164 5 mg·L-1,而阿维菌素LC50为0.453 2 mg·L-1(表1);从毒力回归方程斜率(b值)来看,甲维盐b值比阿维菌素大,表明线虫对甲维盐的敏