钡(Ⅱ)-对羧基偶氮氯膦配合物探针测定蛋白质的研究.pdfVIP

广西师范大学学报(自然科学版) 2003年lO月 oFGUANGXINORMALUNIVERSITY V01．21No．2 JOURNAL 钡(Ⅱ)一对羧基偶氮氯膦配合物探针 测定蛋白质的研究 刘典梅，张琳，赵书林’ (广西师范大学化学化工学院．广西桂林541004) 蛋白质与某些金属配合物可在适当条件下，通过分子间弱的相互作用而缔合成超分子化合物，从而导 2．4的BrittonRobinson(B—R)缓冲溶液中，有乙醇及表面活性剂Tritonx—100存在下，蛋白质的加入使 nm 蓝色的Ba(Ⅱ)CPApK配合物溶液褪色，且褪色程度与蛋白质的浓度成正比，最大褪色波长在647．5 择性好，牛血清白蛋白(BsA)的表观摩尔吸光系数￡一1．13×106 mg／I． 浓度范围内符合Beer定律．用于人血清样品中蛋白质总量的测定，结果满意． 1实验部分 1．1仪器与试剂Tu—l 酸度计(上海雷磁仪器厂)．牛血清白蛋白(BSA，相对分子质量以67000计，上海化学试剂公司)；人血清 白蛋白(HSA，相对分子质量以68 45 x— 膦(CPA—pK)：配成4．0×10moI／I，水溶液．Ba(Ⅱ)：以BaCl2·2HzO配成4．0g／L水溶液．Triton lOO：5％(体积分数比)水溶液．Britton—Robinson(B—R)系列缓冲溶液． 10 1．2实验方法于10mI，容量瓶中，依次加入2．0mI。r mol／1。的 pH2．4的B—R缓冲溶液，1．0mI。4．0×10 ．I 对羧基偶氮氯膦溶液，0．75mI，5％Tritonx—100水溶 ml，4 ml。无水乙醇和 液，0．6 g／t。的Ba(Ⅱ)溶液，3．0 6} 不同体积的蛋白质标准溶液，用水稀释至刻度，摇匀．放 ’r 置10min后，用1cm比色皿以水作参比扫描吸收光谱 ’r 或测定647．5am处Ba(Ⅱ)CPApK配合物的吸光度 2I A。及蛋白质与Ba(Ⅱ)一CPA pK配合物的结合物的吸 光度A，并求出(AA—A。一A)． u500 550 600 650 图i吸收光谱 2结果与讨论 BSA lCPA—pK；2CPA-pK；3BSA—Ba(I)一CPA—pK 0b5 C 10 d15e 20 C峙^(mg／L)：a 2．1吸收光谱CPA—pK，Ba(Ⅱ)一CPA—pK以及它们 基金项目：广西教育厅科学基金资助 作者简介：刘典梅(1976)．女，江西赣州人，耍士研究生 154 广西师范大学学报(自然科学版) 第21卷 pK溶 液为紫红色，最大吸收