他莫昔芬介导小胶质细胞LRRK-2表达对炎症刺激PC12细胞的影响.pdfVIP

广 西医学 2014年7月第36卷第7期 861 他莫昔芬介导小胶质细胞LRRK一2 表达对炎症刺激 PC12细胞的影响▲ 卢 奎 吴文军 周 敏 黎 捷 钟健强 张 成 (I中山大学附属第一医院神经科，广州市 510080，E—mai~lukui945@163．com； 2广东省中山市人民医院神经内科，中山市 528403；3中山大学附属博济医院神经内科 ，广州市 511300) 【摘要】 目的 探讨他莫昔芬对小胶质细胞的富含亮氨酸重复序列激酶2(LRRK2)基因及相关炎症因子 表达的影响。方法 取原代小胶质细胞分为CON组、脂多糖(LPS)组、LPS十他莫昔芬组、LPS+LRRK2组；以 LPS刺激激活小胶质细胞，用他莫昔芬调控小胶质细胞激活；将各组小胶质细胞与大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞 (PC12)细胞共培养24h；WesternBlot法检测小胶质细胞的LRRK2、一氧化氮合成酶(iNOS)表达，酶联免疫吸 附法(ELISA)测定TNF—a、IL一1B水平；Hochest染核法检测PC12细胞凋亡／存活比。结果 他莫昔芬抑制LPS 刺激后小胶质细胞的LRRK2表达，通过抑制LRRK2下调 iNOS、TNF-及 IL一1B释放，进而降低小胶质细胞与 PC12细胞共培养体系炎症表达及PC12细胞凋亡／存活比。结论 LRRK2是小胶质细胞炎症因子 iNOS释放 的上游调控靶点，他莫昔芬可通过调控LRRK2基因抑制小胶质细胞激活，从而减轻炎症相关多巴胺能神经元 损伤 。 【关键词】 帕金森病；他莫昔芬；富含亮氨酸重复序列激酶2；小胶质细胞；肾上腺嗜铬瘤细胞 【中图分类号】 R338．15 【文献标识码】A 【文章编号】 0253—4304(2014)07—0861—04 DoI：10．11675／j．issn．0253—4340．2014．07．01 E ctofTamoxifenonInnammarlon．StimulatedPC12Cells MediatedbyL脚 【-2GeneExpressionofM icrogHa LUKui，WUWen-jun ，ZHOU胁 ，LI ，ZHONG —qiang ，ZHANGCheng (1DepartmentofNeurology，theFirstAffiliatedHospitalofSunYat-senUnive~ity，Guangzhou510080，China； 2DepartmentofNeurology，ZhongshanPeoplesHospitalofGuangdongProvince，Zhongshan528403，hCina； 3DepartmentofNeurology，BojiAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity，Guangzhou511300，China) 【Abstract】Objective Tostudytheeffectoftamoxifenontheexpressionsofleucine—richrepeatkinase2(LRRK-2) geneofmicmgliaandrelatedinflammatoryfactors．Methods Primarymicmgliawasdividedinto4groupsincludingcontrol group，lipopolysaccharide(LPS)group，LPSplustamoxifengroupandLPSplusLRRK-2group．LPS-activatedmicrogliaWas regulatedbytamoxifen．PC12cellsofratswereco—culturde withmicmgliafor24hoursineachgroup．Theexpressionsof LRRK-2geneandiNOSweredetectedbyWesternBlot．Thelevelsoftumo