小柴胡颗粒中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量测定方案.pdfVIP

小柴胡颗粒中柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 的含量测定方案 一、设计背景 小柴胡颗粒是常见的一种中药制剂，处方由柴胡、黄岑、党参、姜半夏、生姜、甘 草、大枣组成，本中药制剂具有清热解毒、散热、疏脾胃的功效，据中医讲 “具有扶正 祛邪”之功效，主要用于外感病、症见寒热往来、胸胁苦满、心烦喜吐、食欲不振等病 症的治疗。现代研究资料表明，小柴胡颗粒主要的药理作用有抗病毒、调节免疫功能、 解热抗炎、保肝护胃、降低激素副作用等。临床研究显示，小柴胡颗粒与其他药物联用 能有效增强治疗病毒性感冒、上呼吸道感染、肺炎方面的疗效。小柴胡颗粒还具有一定 的退热疗效，可显著抑制炎症反应，与激素联用可增强抗炎能力，缩短治疗时间，降低 激素的毒副作用。小柴胡颗粒在中医药临床医学中应用的较为广泛，有关本产品的质量 控制显得尤为重要。小柴胡颗粒中的主要指标成分及有效成分包括黄芩苷、柴胡皂苷 a （化学结构式见图 1）和柴胡皂苷 d （化学结构式见图 2）等成分。经查阅 《中国药典》 （2020 年版）第一部小柴胡颗粒项下的内容得知，目前现行版药典中小柴胡颗粒的质量 标准项下有关含量测定项，只规定了黄芩苷的含量标准，对于小柴胡颗粒中柴胡的主要 成分柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 的质量标准没有收载。故本方案拟设计方法测定小柴胡颗 粒中柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 的含量，以期为小柴胡颗粒的质量标准提高提供一定的参 考依据，也为其临床用药用量提供参考。 图 1 柴胡皂苷 a 图2 柴胡皂苷 d 二、设计依据 经查阅中国知网相关期刊文献资料及 《中国药典》（2020 年版）中有关柴胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 含量测定的资料可知，关于测定柴胡药材或相关单味制剂或复方制剂中柴 胡皂苷 a 和柴胡皂苷 d 的含量测定方法，主要以高效液相色谱法为主。高效液相色谱法 具有分析速度快、灵敏度高、分离效能好、结果精密度高、准确度高、操作相对简单等 优点，尤其适合复方制剂中单个或多个有效成分的含量测定。本方案参考现行版 《中国 药典》及相关期刊文献资料，拟采用高效液相色谱法测定小柴胡颗粒中柴胡皂苷 a 和柴 胡皂苷 d 的含量，旨在为小柴胡颗粒的质量标准提高提供一定的参考依据，也为其临床 用药用量提供相关资料。 三、设计方案 1.仪器与试剂 （1）仪器 赛默飞世尔 Thermo Fisher Scientific U3000 高效液相色谱仪 （厂家：赛默飞世尔 科技公司，代理公司：上海魁元科学仪器有限公司，型号：U3000），Hangpinc-FA2004N 型电子分析天平 （厂家：步青科技有限公司），KH-7200E 超声波清洗器 （厂家：昆山禾 创超声波仪器有限公司），其他仪器有棕色容量瓶等。 （2）试剂 柴胡皂苷 a 对照品 （中国食品药品检定研究院，纯度为 94.8%），柴胡皂苷 d 对照品 （中国食品药品检定研究院，纯度为 96.3%），小柴胡颗粒 （广州白云山光华制药股份有 限公司，规格为 10g*10 袋）（见图 3），乙腈 （色谱纯，Fisher 公司），甲醇 （色谱纯， Fisher 公司），三乙胺 （分析纯，西安天茂化工有限公司），氨水 （分析纯，山东佰仟化 工有限公司），实验中所用的水则是实验室自制的超纯水。 图 3 小柴胡颗粒 （广州白云山光华制药股份有限公司） 2.测定方法 （1）色谱条件 色谱柱 （YMC-Pack ODS-A）(4.6mm×250mm，5 μm，十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂)， 以乙腈（A）-水 （0.5%三乙胺）（B）为流动相进行梯度洗脱 （0.00～20.00min，20%～85%A； 20.01～22.00min，85%～10%A），流速为 1.0ml/min，检测波长 210nm，色谱柱柱温为 30℃， 进样体积为 20 μl。 （2）对照品溶液的制备 分别取柴胡皂苷 a 对照品约 10mg、柴胡皂苷 d 对照品约 12.5mg，精密称定，置于同 一 25ml 棕色容量瓶中，加甲醇使对照品溶解并稀释至刻度线，摇匀，即得每 1m