叶绿体膜上Mg2+-ATPase活性的测定.pdfVIP

2+ 叶绿体膜上Mg -ATPase 活性的测定 叶绿体膜上 ATP 合成酶在光下能催化光合磷酸化的最末一步反应，把 ADP 和P 合成ATP。它i 经激活处理，在暗中可水解ATP 为ADP、P 和进行ATP 与P 的交换反应。叶绿体激活处理可i i 2+ 2+ 2+ 出现需镁 （Mg -ATPase）和需钙 （Ca -ATPase）2 种ATP 酶活性，而Mg -ATPase 活性高。 其活力大小可用测定反应中止后反应液中无机磷含量多少来衡量。 1 仪器设备 -2 -1 研钵、白炽光源 （1000μmol·m ·s ）、台式离心机和分光光度计等。 2 操作方法 2.1叶绿体制备及叶绿素含量测定。 2.2 无机磷标准曲线：在7个试管中每管中加0.1ml20%的三氯乙酸（TCA）、0.3mlH O 和0.1ml 2 Na HPO ，使各管磷含量分别为0、1、2、3、4、5和6μ